DEFINIÇÃO
A adenosina contém NLT 99,0% e NMT 101,0% de C10H13N5O4, calculado com base seca.
IDENTIFICAÇÃO
• A. ABSORÇÃO INFRAVERMELHA<197K>: NMT 0,1%
ENSAIO
• ADENOSINA
Amostra: 200 mg de Adenosina previamente seca a 105° por 2h
Sistema titulométrico
(Ver Titrimetria<541>)
Modo: titulação direta
Titulante: 0,1 N por ácido clorídrico VS
Detecção de endpoint: potenciométrico
Análise: Dissolver em 50 mL de ácido acético glacial e titular com 0,1 N por ácido clorídrico VS. Calcule a porcentagem de Adenosina (C10H13N5O4) na porção tomada:
Resultado = [(V − B) × N × F × 100]/W
V = Volume de titulante da amostra (mL)
B = Volume de titulante branco (mL)
N= normalidade do titulante (mEq/mL)
F= fator de equivalência: 267,25 mg/mEq
W= peso da amostra (mg)
Critérios de aceitação: 99,0%-101,0% na base seca
• IMPUREZAS
• RESÍDUO NA IGNIÇÃO<281>: NMT 0,1%
• METAIS PESADOS, Método II<231>: NMT 10 ppm
• LIMITE DE AMÔNIA
Solução amostra: Suspender 0,5 g em 10 mL de água. Agitar por 30 segundos e passar por filtro grosso. Diluir o filtrado com água até 15 mL e utilizar o filtrado.
Solução padrão: 0,4 µg/mL de cloreto de amônio em água
Análise: À solução amostra e à solução padrão adicione 0,3 mL de iodeto de mercúrico-potássio alcalino TS, tampe os tubos de ensaio e deixe repousar por 5 min.
Critérios de aceitação: A solução amostra não apresenta coloração amarela mais intensa que a solução padrão (NMT 4 ppm de amônia).
• LIMITE DE CLORETO
Solução amostra: Suspender 0,2 g em 10 mL de água. Agitar por 30 s, passar por filtro grosso e aproveitar o filtrado.
Solução padrão: 2,3 µg/mL de cloreto de sódio em água
Análise: À solução amostra e 10 mL da solução padrão adicione 1 mL de ácido nítrico e 1 mL de nitrato de prata TS e dilua cada solução com água até 40 mL. Deixar as soluções repousar durante 5 min, protegidas da luz.
Critérios de aceitação: Quando vista contra um fundo escuro, a solução amostra não é mais turva que a solução padrão (NMT 0,007% cloreto).
• LIMITE DE SULFATO
Solução amostra: Suspender 0,75 g em 15 mL de água. Agitar por 30 s, passar por filtro grosso e aproveitar o filtrado.
Solução padrão: Adicione 0,15 mL de ácido sulfúrico 0,020 N a 15 mL de água.
Análise: À solução amostra e à solução padrão adicione 2 mL de cloreto de bário TS e 1 mL de ácido clorídrico 3 N, dilua cada solução com água até 30 mL e misture. Deixe as soluções repousarem por 5 min.
Critérios de aceitação: A solução amostra não é mais turva que a solução padrão (NMT 0,02% sulfato).
• IMPUREZAS ORGÂNICAS
Solução A: 6,8 g/L de hidrogenossulfato de potássio e 3,4g/L de hidrogenossulfato de tetrabutilamônio em água. Ajustar com hidróxido de potássio 2 N para um pH de 6,5.
Solução B: 0,1 g/L de solução de azida de sódio
Fase móvel: Solução A e Solução B (60:40)
Solução de adequação do sistema: 0,2 mg/mL de adenosina e inosina na fase móvel
Solução amostra: 1,0 mg/mL de Adenosina em Fase Móvel
Sistema cromatográfico
(Ver Cromatografia<621>, Adequação do Sistema.)
Modo: LC
Detector: UV 254nm
Coluna: 4,6-mm × 25-cm; Embalagem L1 de 5-µm
Taxa de fluxo: 1,5 mL/min
Tamanho da injeção: 20 μL
Adequação do sistema
Amostras: Solução de adequação do sistema
Requisitos de adequação
Resolução: NLT 9.0 entre adenosina e inosina
Fator de cauda: NMT 2,5
Desvio padrão relativo: NMT 2,0%
[NOTA- Cromatografe a solução de amostra e ajuste o tempo de execução para pelo menos duas vezes o tempo de retenção do pico principal.]
Análise
Amostra: Solução de amostra
Calcule a porcentagem de cada impureza na porção de Adenosina tomada:
Resultado = (rU/rT) × 100
rU = resposta de pico de cada impureza da solução amostral
rT = soma de todas as respostas para todos os picos da solução amostral
Critérios de aceitação
Impurezas individuais: NMT 0,1% cada de guanosina, inosina e uridina e NMT 0,2% de adenina
Impurezas totais: NMT 0,5%
TESTES ESPECÍFICOS
• FAIXA DE FUSÃO OU TEMPERATURA<741>: 233°-238°
• ROTAÇÃO ÓPTICA, Rotação Específica<781S>: -68° a -72°
Solução teste: 20 mg/mL em solução de hidróxido de sódio (1 em 20), determinada em amostra previamente seca a 105° por 2h
ACIDEZ OU ALCALINIDADE: Suspender 1 g em 20 mL de água livre de dióxido de carbono. Agitar por 30 segundos e passar por filtro grosso. A cada uma das duas porções de 10 mL do filtrado adicionar 0,1 mL de TS roxo de bromocresol.
Critérios de aceitação: NMT 0,3 mL de hidróxido de sódio 0,01 N são necessários para produzir uma cor azul-violeta em uma porção. NMT É necessário 0,1 mL de ácido clorídrico 0,01 N para produzir uma cor amarela na outra porção.
• SECAGEM POR PERDA <731>: Secar uma amostra a 105°C por 2 h: ela perde NMT 0,5% do seu peso.
REQUISITOS ADICIONAIS
• EMBALAGEM E ARMAZENAGEM: Conservar em recipientes hermeticamente fechados e resistentes à luz e armazenar em temperatura ambiente controlada.
• PADRÕES DE REFERÊNCIA USP<11>
USP Adenosina RS