Bacitracinas, complexo de zinco.
Complexo de bacitracinas e zinco [1405-89-6].
» Bacitracina Zinco é o complexo de zinco da bacitracina, que consiste em uma mistura de polipeptídeos antimicrobianos, sendo os principais componentes as bacitracinas A, B1, B2 e B3. Tem uma potência não inferior a 65 Unidades de Bacitracina por mg, calculada com base na forma seca. Contém não menos que 4,0 por cento e não mais que 6,0 por cento de zinco (Zn), calculado com base na secagem.
Embalagem e armazenamento - Conservar em recipientes bem fechados e guardar em local fresco.
Rotulagem-Rotule-o para indicar que deve ser usado apenas na fabricação de medicamentos não parenterais. Quando for embalado para manipulação sob prescrição médica, rotule-o para indicar que não é estéril e que a potência não pode ser garantida por mais de 60 dias após a abertura, e para indicar o número de Unidades de Bacitracina por miligrama. Quando se destina à preparação de formas farmacêuticas estéreis, o rótulo indica que é estéril ou deve ser submetido a processamento adicional durante a preparação de formas farmacêuticas estéreis.
Padrões de referência USP<11>-
USP Bacitracina Zinco RS
Identificação-
A: Teste de identificação cromatográfica de camada fina<201BNP>: atende aos requisitos.
B: Atende aos requisitos do procedimento cromatográfico líquido no teste de Composição.
Esterilidade<71>-Onde o rótulo indica que é estéril, ele atende aos requisitos quando testado conforme indicado para Filtração por Membrana em Teste de Esterilidade do Produto a ser Examinado, exceto para usar o Fluido A a cada L do qual foram adicionados 20 g de edetato dissódico.
pH<791>: entre 6,0 e 7,5, em solução (saturada) contendo aproximadamente 100 mg por mL.
Perda por secagem<731>-Secar cerca de 100 mg em frasco capilar-com rolha em vácuo a 60ºC durante 3 horas: não perde mais de 5,0% do seu peso.
Teor de zinco- [nota-As Preparações Padrão e a Preparação Teste podem ser diluídas quantitativamente com ácido clorídrico 0,001 N, se necessário, para obter soluções de concentrações adequadas, adaptáveis ​​à faixa linear ou de trabalho do instrumento. ]
Preparações padrão-Transferir 3,11 g de óxido de zinco, pesado exatamente, para um balão volumétrico de 250 mL, adicionar 80 mL de ácido clorídrico 1 N, aquecer para dissolver, esfriar, diluir com água até o volume e misturar. Esta solução contém 10 mg de zinco por mL. Diluir ainda mais esta solução com ácido clorídrico 0,001 N para obter preparações padrão contendo 0,5, 1,5 e 2,5 µg de zinco por mL, respectivamente.
Preparação do teste-Transferir cerca de 200 mg de Bacitracina Zinco, pesados ​​com precisão, para um balão volumétrico de 100-mL. Dissolver em ácido clorídrico 0,01 N, diluir com o mesmo solvente até o volume e misturar. Pipetar 2 mL desta solução para um balão volumétrico de 200 mL, diluir com ácido clorídrico 0,001 N até completar o volume e misturar.
Procedimento-Determinar concomitantemente as absorbâncias das preparações Padrão e da preparação Teste na linha de ressonância de zinco de 213,8 ​​nm, com um espectrofotômetro de absorção atômica adequado (ver Espectrofotometria e Espalhamento de Luz<851>), equipado com uma lâmpada catódica oca de zinco e uma chama de ar-acetileno, usando ácido clorídrico 0,001 N como branco. Trace as absorvâncias das preparações padrão versus concentração, em µg por mL, de zinco e desenhe a linha reta que melhor se ajusta aos três pontos traçados. A partir do gráfico assim obtido, determine a concentração, em µg por mL, de zinco na preparação do teste. Calcule o teor de zinco, em porcentagem, na porção de Bacitracina Zinco tomada pela fórmula:
1000C/W
em que C é a concentração, em µg por mL, de zinco na preparação do Teste; e W é o peso, em mg, da porção de Bacitracina Zinco ingerida.
Composição-
Buffer- Dissolver 34,8 g de fosfato de potássio dibásico em 1 L de água. Ajustar com 27,2 g de fosfato de potássio, monobásico, dissolvido em 1 L de água, até pH 6,0.
Fase Móvel-Prepare uma mistura de metanol, água, tampão e acetonitrila (26:15:5:2). Misture bem e desgaseifique.
Diluente-Dissolver 40 g de edetato dissódico em 1 L de água. Ajuste com hidróxido de sódio diluído para um pH de 7,0.
Solução de adequação do sistema-Dissolva uma quantidade pesada com precisão de Bacitracina Zinco RS da USP no Diluente para obter uma solução com uma concentração nominal de cerca de 2,0 mg por mL.
Solução limite de relatório-Diluir quantitativamente, com água, um volume adequado de solução de adequação do sistema para obter uma solução com concentração conhecida de 0,01 mg por mL.
Solução de identificação de pico-Dissolva uma quantidade pesada de Bacitracina Zinco RS da USP em um volume adequado de Diluente para obter uma solução com concentração nominal de cerca de 2,0 mg por mL. Aquecer em banho-maria fervente por 30 minutos. Resfrie à temperatura ambiente.
Solução de teste-Dissolva uma quantidade pesada com precisão de Bacitracina Zinco em Diluente para obter uma solução com uma concentração nominal de cerca de 2,0 mg por mL.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografia<621>)-O cromatógrafo líquido é equipado com um detector de absorbância e uma tampa final 4.6- coluna × 250-mm que contém empacotamento L1 de 5-µm. A taxa de fluxo é de 1,0 mL por minuto. Defina o comprimento de onda do detector em 300 nm. Injete cerca de 100 μL da solução de identificação de pico e identifique a localização da bacitracina F, que é uma impureza conhecida, usando o tempo de retenção relativo mostrado na Tabela 1.
Tabela 1
Nome do Componente Tempo de Retenção Relativo (aproximado)
Bacitracina C1 0,5
Bacitracina C2 0,6
Bacitracina C3 0,6
Bacitracina B1 0,7
Bacitracina B2 0,7
Bacitracina B3 0,8
Bacitracina A 1.0
Bacitracina F 2.4
Altere o comprimento de onda do detector e defina-o para 254 nm. Cromatografe a solução de adequação do sistema e registre as respostas dos picos conforme indicado no Procedimento: identifique os picos dos componentes mais ativos da bacitracina (bacitracinas A, B1, B2 e B3), peptídeos de eluição precoce (aqueles que eluem antes do pico devido à bacitracina B1) e a impureza, bacitracina F, usando os valores relativos do tempo de retenção dados na Tabela 1. Calcule a relação pico - para - vale usando a fórmula:
HP / AT
em que Hp é a altura acima da linha de base do pico devido à bacitracina B1; e HV é a altura acima da linha de base do ponto mais baixo da curva que separa o pico da bacitracina B1 do pico devido à bacitracina B2. A relação pico - para - vale não é inferior a 1,2.
Procedimento-Injete separadamente volumes iguais (100 µL) de diluente, solução de teste e solução de limite de relatório. Registre os cromatogramas para cerca de três vezes o tempo de retenção da bacitracina A. Identifique os picos usando os tempos de retenção relativos mostrados na Tabela 1. Meça as áreas de todos os picos na solução de teste. [nota-Desconsidere qualquer pico na solução de teste que tenha uma área menor que a área do pico de bacitracina A na solução de limite de relatório; desconsidere qualquer pico observado no Diluente.]
note-A área total nos cálculos a seguir é definida como a área de todos os picos, exceto o limite de relatório.
conteúdo de bacitracina a-Calcule a porcentagem de bacitracina A usando a fórmula:
(ra/Área total) × 100
em que rA é a área de resposta da bacitracina A. O conteúdo de bacitracina A não é inferior a 40,0% da área total.
conteúdo de bacitracina ativa-Calcule a porcentagem de bacitracina ativa (bacitracina A, B1, B2 e B3) usando a fórmula:
(rA + rB1 + rB2 + rB3 / Área total)×100
em que rA, rB1, rB2 e rB3 são as respostas de área da bacitracina A, B1, B2 e B3, respectivamente. A soma da bacitracina A, B1, B2 e B3 não é inferior a 70,0% da área total.
limite de peptídeos de eluição precoce-Calcule a porcentagem de todos os picos eluídos antes do pico devido à bacitracina B1 usando a fórmula:
(rPreB1 / Área total) ×100
em que rPreB1 é a soma das respostas de todos os picos que eluem antes do pico da bacitracina B1. O limite de peptídeos com eluição precoce (aqueles que eluem antes do pico devido à bacitracina B1) não é superior a 20,0%.
limite de bacitracina f- Calcule a porcentagem de bacitracina F usando a fórmula:
100 × (rF/ra)
em que rF é a resposta da bacitracina F da solução teste; e rA é a resposta da bacitracina A da solução teste. O limite da bacitracina F, uma impureza conhecida, não é superior a 6,0%.
Ensaio-Prossiga com Bacitracina Zinco conforme indicado em Antibióticos-Ensaios Microbianos 81.