Cloreto de Colina
C5H14ClNO 139,62
Cloreto de (2-hidroxietil)trimetilamônio;
2-Hidroxi-N,N,N-cloreto de trimetiletanamínio [67-48-1].
DEFINIÇÃO
O Cloreto de Colina contém NLT 99,0% e NMT 100,5% de cloreto de colina (C5H14ClNO), calculado na base anidra.
IDENTIFICAÇÃO
• A. Absorção infravermelha<197K>
• B. Testes de identificação-Geral, Cloreto<191>: Uma solução (1 em 20) atende aos requisitos.
ENSAIO
• Procedimento
Amostra: 120 mg
Sistema titulométrico
(Veja Titrimetria<541>.)
Modo: titulação direta
Titulante: nitrato de prata 0,1 N VS
Detecção de endpoint: potenciométrico
Branco: 35 mL de água. Adicione 3 gotas de ácido acético.
Análise: Dissolver a Amostra em 35 mL de água e adicionar 3 gotas de ácido acético. Titular com Titulante.
Calcule a porcentagem de cloreto de colina (C5H14ClNO) na amostra colhida:
Resultado = [(V B) × N × F × 100]/W
V = Volume de titulante da amostra (mL)
B = Volume de titulante branco (mL)
N = normalidade do titulante (mEq/mL)
F = fator de equivalência, 139,6 mg/mEq
W = peso da amostra (mg)
Critérios de aceitação: 99,0%-100,5% na base anidra
IMPUREZAS
• Solventes Residuais<467>: Atende aos requisitos, exceto que o limite para 1,4-dioxano é 10 µg/g
• Resíduo na ignição<281>: NMT 0,05%
• Arsênico, Método I<211>
Análise: Adicione 30 mL de água e 5 mL de ácido clorídrico para dissolver a amostra.
Critérios de aceitação: NMT 2 ppm
• Liderar<251>
[Nota-Use cloreto de metileno no lugar de clorofórmio para preparar a solução de extração de ditizona e a solução padrão de ditizona. ]
Solução A: Transfira 8,4 g de solução de hidróxido de sódio (1 em 2) para uma garrafa plástica, adicione 100 mL de hidróxido de amônio e misture.
Solução padrão: Transfira 1,0 mL da solução padrão diluída de chumbo para um funil de separação contendo 25,0 mL de água.
Solução amostra: Dissolva 3,00 g de Cloreto de Colina em um funil de separação contendo 25,0 mL de água.
Análise
Amostras: solução padrão e solução amostral
Adicione separadamente 6,0 mL de solução de citrato de amônio e 3,0 mL de solução de cianeto de potássio à solução padrão e à solução amostra. Extraia cada uma das soluções resultantes três vezes com porções de 5,0 mL de solução de extração de ditizona, agitando por 60 s e drenando cada extrato para outro separador. Agite as soluções combinadas de ditizona por 30 s com 20,0 mL de ácido nítrico (1 em 100) e descarte a camada de cloreto de metileno. Adicione 6,0 mL de solução de amônia-cianeto, 2 mL de solução A e 10 mL de solução padrão de ditizona e agite por 45 s. Permitir que as fases se separem e medir a absorvância da camada inferior a 510 nm com um espectrofotómetro adequado.
Critérios de aceitação: A absorbância da solução amostra é NMT a absorbância da solução padrão (NMT 0,3 ppm).
• Metais Pesados, Método II<231>: NMT 10 ppm
• Limite de Aminas Totais
Solução padrão: 500 µg/mL de cloridrato de trimetilamina em água
Solução amostra: Transfira 10,0 g de cloreto de colina para um béquer contendo uma barra de agitação revestida de plástico, adicione 170 mL de água e 30,0 mL de hidróxido de sódio TS e mexa até dissolver.
Solução estoque de adequação do sistema: 10 µg/mL de cloridrato de trimetilamina em água
Solução de adequação do sistema: Transfira 10,0 mL de solução estoque de adequação do sistema para um béquer contendo uma barra de agitação revestida de plástico, adicione 160 mL de água e 30,0 mL de hidróxido de sódio TS e agite até dissolver.
Sistema de eletrodo: Use um eletrodo indicador específico para amônia, com detecção de gás e referência interna conectado a um medidor de pH capaz de medir potenciais com reprodutibilidade mínima de ±0,1 mV (ver pH 791).
Linha de resposta padrão: Misture 30,0 mL de hidróxido de sódio TS e 170 mL de água. Adicione uma barra de agitação revestida de plástico, insira o eletrodo na solução e registre o potencial, em mV. Continue mexendo e, em intervalos de 5 min, adicione 0,200, 0,600, 1,00 e 2,00 mL de solução padrão e registre o potencial após cada adição. Plote os logaritmos das concentrações cumulativas de cloridrato de trimetilamina (0,50, 1,50, 2,50 e 5,00 μg/mL) versus potencial, em mV, e determine a inclinação (S) da linha de resposta padrão para o eletrodo.
Adequação do sistema
Amostra: Solução de adequação do sistema
Proceda conforme indicado em Análise, exceto para substituir a solução amostra pela solução de adequação do sistema e na fórmula abaixo para substituir W por V, que equivale a 10 mL.
Requisitos de adequação: A alteração total é NLT 10 mV para uma adição cumulativa de 0,4 mL da solução padrão; a quantidade de cloridrato de trimetilamina encontrada é de 8,5-11,5 µg/L.
Análise
Amostras: solução padrão e solução amostral
Enxágue o eletrodo, insira-o na solução amostra, mexa e registre o potencial, em mV. Adicione 0,100 mL da solução padrão e registre o potencial. Adicione mais 0,100 mL da solução padrão e registre o potencial. [Nota – Se a alteração total após a segunda adição da solução padrão for inferior a 10 mV, adicione uma terceira alíquota de 0,200 mL.]
Calcule o teor, em µg/g, de aminas totais como cloridrato de trimetilamina na porção da amostra colhida:
Resultado = (CS × VA)/[(F 1) × W]
CS = concentração da solução padrão (µg/mL)
VA = volume total da solução padrão adicionada à solução amostra (mL)
W = peso de cloreto de colina tomado para preparar a solução amostral (g)
F = fator de correção, calculado pela fórmula:
F = antilog [(mVF mV0)/S]
mVF = leitura final após as adições da solução padrão (mV)
mV0 = leitura inicial da solução amostra (mV)
S = inclinação da linha de resposta padrão para o eletrodo
Critérios de aceitação: NMT 10 µg/g
• Pureza Cromatográfica
Solução tampão: 7,1 g/L de fosfato de sódio dibásico anidro. Ajuste com ácido fosfórico para um pH de 2,5.
Fase móvel: Solução tampão e acetonitrila (7:3)
Solução padrão: Transfira uma quantidade, NMT 100 mg, de cloreto de colina USP RS para um frasco com tampa de rosca de 24 mL e adicione 400 mg de cloreto de 3,5 dinitrobenzoíla e 10 mL de acetonitrila. Tampe o frasco, aqueça a 55ºC e continue aquecendo por 2 h. Resfrie à temperatura ambiente e adicione 5 mL de água. Deixe repousar por 5 min. Transferir quantitativamente a solução para um balão volumétrico de 25 mL e diluir com acetonitrila até o volume. Diluir um volume desta solução com Fase Móvel para obter uma concentração de 2,0 µg/mL de Cloreto de Colina USP RS.
Solução amostra: Transfira 110 mg de cloreto de colina para um frasco com tampa de rosca de 24 mL. Secar a 120ºC por 2 h. Adicionar 400 mg de cloreto de 3,5-dinitrobenzoíla e 10 mL de acetonitrila. Tampe o frasco, aqueça a 55ºC e continue aquecendo por 2 h. Resfrie à temperatura ambiente e adicione 5 mL de água. Deixe repousar por 5 min. Transferir quantitativamente a solução para um balão volumétrico de 50 mL e diluir com Fase móvel até volume. Pipetar 2,0 mL da solução para um balão volumétrico de 25 mL e diluir com Fase móvel até o volume.
Sistema cromatográfico
(Ver Cromatografia<621>, Adequação do Sistema.)
Modo: LC
Detector: UV 208nm
Coluna: 4,6-mm × 25-cm; embalagem L7
Temperatura da coluna: 30
Taxa de fluxo: 1,0 mL/min
Tamanho da injeção: 20 μL
Adequação do sistema
Amostra: Solução padrão
Requisitos de adequação
Fator de capacidade (k'): NLT 2
Desvio padrão relativo: NMT 5%, determinado a partir do pico do derivado de colina
Análise
Amostras: solução padrão e solução amostral
Calcule a porcentagem de cada impureza na porção de cloreto de colina tomada:
Resultado = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = resposta de pico para cada impureza, excluindo aquela para o derivado de colina e ácido 3,5-dinitrobenzóico da solução amostra
rS = resposta de pico para o derivado de colina da solução padrão
CS = concentração de Cloreto de Colina USP RS na Solução Padrão (mg/mL)
CU = concentração de cloreto de colina na solução amostra (mg/mL)
Critérios de aceitação
Impurezas individuais: NMT 0,3%
Impurezas totais: NMT 2,0%
TESTES ESPECÍFICOS
• pH<791>: 4,0-7,0, em solução (1 em 10)
• Determinação de Água, Método I<921>: NMT 0,5%
REQUISITOS ADICIONAIS
• Embalagem e Armazenamento: Conservar em recipientes bem fechados.
• Padrões de referência da USP<11>
Cloreto de colina USP RS