Betadex Sulfobutílico Éter Sódico
C42H70-nO35·(C4H8SO3Na)n 2163 quando n = 6,5
Éteres sulfobutílicos de beta ciclodextrina, sais de sódio;
Beta ciclodextrina sulfobutil éter sódico [182410-00-0].
DEFINIÇÃO
Betadex Sulfobutyl Ether Sodium é preparado por alquilação de betadex usando 1,4 - butano sultona sob condições básicas
O grau médio de substituição no betadex é NLT 6,2 e NMT 6,9.
Contém NLT 95,0% e NMT 105,0% de C42H70-nO35·(C4H8SO3Na)n (n = 6,2-6,9), calculado na base anidra.
IDENTIFICAÇÃO
• A. ABSORÇÃO INFRAVERMELHA<197K>
• B. O tempo de retenção do pico principal da solução amostra corresponde ao da solução padrão, conforme obtido no Ensaio.
• C. Atende aos requisitos da prova de Grau Médio de Substituição.
• D. TESTES DE IDENTIFICAÇÃO-GERAL, Sódio<191>
ENSAIO
• PROCEDIMENTO
Fase móvel: nitrato de potássio 0,1 M em mistura de acetonitrila e água (1:4)
Solução padrão: 10 mg/mL de USP Betadex Sulfobutyl Ether Sodium RS em fase móvel
Solução amostra: 10 mg/mL de Betadex Sulfobutil Éter Sódico em Fase Móvel
Sistema cromatográfico
(Ver Cromatografia<621>, Adequação do Sistema.)
Modo: LC
Detector: índice de refração
Temperatura do detector: 35 ± 2°
Coluna: coluna analítica de 7,8-mm × 30-cm; embalagem L37. [NOTA-Enxágue a coluna com uma solução de acetonitrila e água (1:9) ao final da série de corridas.]
Taxa de fluxo: 1,0 mL/min
Tamanho da injeção: 20 μL
Adequação do sistema.
Amostra: Solução padrão
Requisitos de adequação
Desvio padrão relativo: NMT 2,0%
Análise
Amostras: solução padrão e solução amostral
Calcule a porcentagem de betadex sulfobutil éter sódico [C42H70-nO35·(C4H8SO3Na)n] na porção de Betadex sulfobutil éter sódico tomada:
Resultado = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = resposta de pico para éter sulfobutil betadex
sódio da solução amostra
rS = resposta de pico para éter sulfobutil betadex
sódio da solução padrão
CS = concentração de Éter Sulfobutílico USP Betadex
RS de sódio na solução padrão (mg/mL)
CU = concentração de Betadex Sulfobutil Éter Sódico na Solução Amostra (mg/mL)
Critérios de aceitação: 95,0%~105,0% na base anidra
IMPUREZAS
• METAIS PESADOS, Método II<231>: NMT 5 ppm
• LIMITE DE BETA CICLODEXTRINA (BETADEX)
Solução A: hidróxido de sódio 25 mM
Solução B: hidróxido de sódio 250 mM e nitrato de potássio 1 M
Fase móvel: Ver Tabela 1.
Tabela 1

Solução padrão: 2 µg/mL de USP Beta Ciclodextrina RS
Solução amostra: 2 mg/mL de Betadex Sulfobutil Éter Sódico
Sistema cromatográfico
(Ver Cromatografia<621>, Adequação do Sistema e Cromatografia de Íons<1065>.)
Modo: CI
Detector: Amperometria pulsada (célula amperométrica com eletrodo de trabalho de ouro e eletrodo de referência de prata)
Coluna
Guarda: troca de ânions de 4,0-mm × 5-cm; embalagem L61
Analítico: troca aniônica de 4,0-mm × 25-cm;
embalagem L61
Temperatura da coluna: 50 ± 2°
Taxa de fluxo: 1,0 mL/min
Tamanho da injeção: 20 μL
Forma de onda para detector amperométrico pulsado: Consulte a Tabela 2.
Tabela 2

Adequação do sistema
Amostra: Solução padrão
Requisitos de adequação
Desvio padrão relativo: NMT 5,0%
Análise
Amostras: solução padrão e solução amostral
Calcule a porcentagem de beta ciclodextrina (betadex) na porção de Betadex Sulfobutil Éter Sódico tomada:
Resultado = (rU/rS) × (CS/CU) × F × 100
rU = resposta de pico para beta ciclodextrina da solução amostra
rS = resposta de pico para beta ciclodextrina da solução padrão
CS = concentração de USP Beta Ciclodextrina RS na solução padrão (µg/mL)
CU = concentração de Betadex Sulfobutil Éter Sódico na Solução Amostra (mg/mL)
F = fator de conversão (10-3 mg/µg)
Critérios de aceitação: NMT 0,1%
• LIMITE DE 1,4-SULTONA BUTANO
Solução padrão interno: 0,25 µg/mL de dietilsulfona
Solução estoque padrão A: 0,5 µg/mL de 1,4-butano sultona
Solução estoque padrão B: 1,0 µg/mL de 1,4-butano sultona
Solução estoque padrão C: 2,0 µg/mL de 1,4-butano sultona
Solução estoque de amostra: 250 mg/mL de Betadex Sulfobutyl Ether Sodium na solução de padrão interno
Solução em branco e soluções de amostra A, B, C e D:
Siga a Tabela 3 para colocar as quantidades de solução padrão interno, cada solução estoque padrão, solução estoque amostra, água ou cloreto de metileno em cada tubo de ensaio de vidro com rolha. [NOTA-Um tubo de ensaio com tampa rosqueada de 10 mL é adequado.] Misture em um misturador vórtex cada tubo de ensaio por 30 s e deixe repousar por pelo menos 5 min ou até a separação completa da fase. Extraia a fase orgânica em um frasco de GC e sele. [NOTA-Com muito cuidado, tome a quantidade mínima possível de fase aquosa.] As quantidades adicionadas de 1,4-butano sultona nas soluções de amostra A, B, C e D são 0,5, 1,0, 2,0 e 0 µg, respectivamente.
Tabela 3

[NOTA-Prepare imediatamente antes de usar.]
Sistema cromatográfico
(Ver Cromatografia<621>, Adequação do Sistema.)
Modo: GC
Detector: Ionização de chama
Coluna: coluna capilar de sílica fundida de 0,32-mm × 25-m; Camada de 0,5-µm da fase G46
Temperatura
Detector: 270°
Porta de injeção: 200°
Coluna: Veja o programa de temperatura na Tabela 4
Tabela 4
Temperatura inicial (°) Rampa de temperatura (°/min) Temperatura final (°) Tempo de manutenção na temperatura final (min)
100 10 200 -
200 35 270 5
Gás de arraste: Hélio, normalmente com pressão de entrada de 12 psi
Tamanho da injeção: 1,0 μL
Tipo de injeção: injeção sem divisão por 0,5 min e depois dividida em 50 mL/min. [NOTA-Recomenda-se o uso de um liner de injeção splitless apropriado.]
Adequação do sistema
Amostra: Solução de amostra B
[NOTA-Os tempos de retenção relativos para dietilsulfona e 1,4-butano sultona são 0,7 e 1,0, respectivamente.]
Requisitos de adequação
Desvio padrão relativo: NMT 10,0%
Análise
Amostras: solução em branco, soluções de amostra A, B, C e D
Corrija a proporção de respostas de pico da 1,4-butano sultona para dietilsulfona na solução amostra A, B, C ou D subtraindo a proporção de respostas de pico da 1,4-butano sultona para etilsulfona na solução em branco. Trace a razão corrigida entre o pico de resposta de 1,4-butano sultona e o pico de resposta de dietilsulfona na solução amostra A, B, C ou D, versus a quantidade adicionada, em µg, de 1,4-butano sultona. Extrapole a linha que une os pontos do gráfico até encontrar o eixo das quantidades. A distância entre este ponto e a intersecção dos eixos representa a quantidade de 1,4-butano sultona, A, em µg, na porção de 4-mL da solução estoque da amostra. Calcule o conteúdo de 1,4-butano sultona na porção de Betadex Sulfobutil Éter Sódico tomada:
Resultado = A/(VExt × CU × F)
A = determinado acima
VExt = volume da solução estoque amostral utilizada na etapa de extração, 4,0 mL
CU = concentração de Betadex Sulfobutil Éter Sódico na solução estoque da amostra (mg/mL)
F = fator de conversão (10-3 g/mg)
Critérios de aceitação: hidroxibutano-1-ácido sulfônico ou NMT 0,5 ppm
• LIMITE DE CLORETO DE SÓDIO, 4-HIDROXIBUTANO-1-ÁCIDO SULFÔNICO E BIS(4-SULFOBUTIL) ÉTER DISSÓDICO
Solução A: hidróxido de sódio 5 mM, desgaseificar em recipiente fechado por 15 min
Solução B: hidróxido de sódio 25 mM, desgaseificar em recipiente fechado por 15 min
Fase móvel: Ver Tabela 5
Tabela 5

Solução de lavagem de coluna A: citrato de sódio 50 mM
Solução de lavagem de coluna B: hidróxido de sódio 150 mM
Solução padrão: Prepare uma solução com concentrações conhecidas de 8 µg/mL de Cloreto de Sódio RS da USP, 4µg/mL de ácido 4-hidroxibutano-1-sulfônico e 4 µg/mL de bis(4-sulfobutil) éter dissódico.
Solução amostra: 4 mg/mL de Betadex Sulfobutil Éter Sódico
Sistema cromatográfico
(Ver Cromatografia<621>, Adequação do Sistema e Cromatografia de Íons<1065>.)
Modo: CI
Detector: Condutividade
Faixa: 30 µS
Corrente: 100 mA
Coluna: [NOTA-No final de cada execução, limpe a coluna usando a solução de lavagem de coluna A a uma vazão de 1 mL/min por 35 min e depois usando a solução de lavagem de coluna B na mesma vazão por 35 min.]
Guarda: troca de ânions de 4,0-mm × 5,0-cm; embalagem L61
Analítico: troca aniônica de 4,0-mm × 25-cm; embalagem L61
Temperatura da coluna: 30°
Supressor: Autossupressor de ânions de micromembrana1 ou um sistema de supressão química adequado
Supressor: Autossupressão
Taxa de fluxo: 1,0 mL/min
Tamanho da injeção: 20 μL
Adequação do sistema
Amostra: Solução padrão
[NOTA-Os tempos de retenção relativos são fornecidos apenas para fins informativos. Os tempos de retenção relativos para íon 4-hidroxibutano-1-sulfonato, íon cloreto e íon éter bis(sulfobutil) são 1,0, 1,4 e 8,6, respectivamente.]
Requisitos de adequação
Resolução: NLT 2.0
Desvio padrão relativo: NMT 10,0%
Análise
Amostras: solução padrão e solução amostral
Calcule a porcentagem de cloreto de sódio, ácido 4 - hidroxibutano - 1 - sulfônico ou éter bis (sulfobutil) dissódico na porção de Betadex Sulfobutil Éter Sódico tomada:
Resultado = (rU/rS) × (CS/CU) × F × 100
rU = resposta de pico para cloreto de sódio, 4 - hidroxibutano - 1 - ácido sulfônico ou éter bis (sulfobutil) dissódico da solução de amostra
rS = resposta de pico para cloreto de sódio, ácido 4 - hidroxibutano - 1 - sulfônico ou éter bis (sulfobutil) dissódico da solução padrão
CS = concentração de cloreto de sódio, ácido 4-hidroxibutano-1-sulfônico ou éter bis(sulfobutil) dissódico na solução padrão (µg/mL)
CU = concentração de Betadex Sulfobutil Éter Sódico na Solução Amostra (mg/mL)
F = fator de conversão (10−3 0 100 0 mg/µg)
Critérios de aceitação
Cloreto de sódio: NMT 0,2%
4-Hidroxibutano-1-ácido sulfônico: NMT 0,09%
Éter bis(sulfobutil) dissódico: NMT 0,05%
TESTES ESPECÍFICOS
TESTE DE ENDOTOXINAS BACTERIANAS<85>: O nível de endotoxinas bacterianas é tal que o requisito da(s) monografia(s) de forma farmacêutica relevante em que Betadex Sulfobutil Éter Sódico é usado pode ser atendido. Quando o rótulo indica que Betadex Sulfobutil Éter Sódico deve ser submetido a processamento adicional durante a preparação de formas farmacêuticas injetáveis, o nível de endotoxinas bacterianas é tal que o requisito da(s) monografia(s) de forma farmacêutica relevante em que Betadex Sulfobutil Éter Sódico é usado pode ser atendido.
• TESTES DE ENUMERAÇÃO MICROBIANA<61>e TESTES PARA MICRORGANISMOS ESPECIFICADOS<62>: A contagem microbiana aeróbia total não excede 100 ufc/g, e a contagem total combinada de bolores e leveduras não excede 50 ufc/g. Atende aos requisitos do teste de ausência de Escherichia coli.
• CLAREZA DA SOLUÇÃO
Solução de amostra: solução a 30% (p/v)
Análise: Examine a solução da amostra usando uma caixa de luz contra fundos brancos e pretos e registre a presença de qualquer névoa, fluorescência, fibras, partículas ou outros materiais estranhos.
Critérios de aceitação: A solução é límpida e essencialmente livre de partículas de materiais estranhos.
• GRAU MÉDIO DE SUBSTITUIÇÃO
Executar eletrólito: ácido benzóico 30 mM e ajustado para um pH adequado para o instrumento usado pela adição de tampão tris (hidroximetil) aminometano 100 mM.
[NOTA-Devido à variação entre capilares, não é especificado um único pH de eletrólito universalmente aplicável.
Em vez disso, o pH ideal associado a cada capilar individual deve ser determinado de acordo com o manual instrumental.]
Solução padrão: 10 mg/mL de USP Betadex Sulfobutyl Ether Sodium RS
Solução amostra: 10 mg/mL de Betadex Sulfobutil Éter Sódico
Procedimento de lavagem capilar: Use frascos de eletrólito de execução separados para lavagem capilar e análise de amostras. Realize lavagens de pré-análise diariamente antes de cada análise: enxágue o capilar com hidróxido de sódio 0,1 N por 30 min, com água por NLT por 2 horas e com Run eletrólito por NLT por 1 h. Realize lavagens pré-injeção antes de cada injeção da seguinte maneira. Enxágue o capilar com hidróxido de sódio 0,1 N por NLT por 1 min e com eletrólito Run por NLT por 3 min. Se um novo capilar estiver sendo utilizado, além dos enxágues regulares descritos acima, um novo capilar necessitará de enxágue antes de seu primeiro uso. Enxágue o novo capilar com hidróxido de sódio 1 M por 1 h, seguido de um enxágue com água por 2 horas.
Sistema eletroforético
(Veja Eletroforese Capilar<1053>.)
Modo: CE de alto - desempenho
Detector: UV inverso 200 nm, com largura de banda de 20 nm. [NOTA-Um comprimento de onda de detecção de 205 nm com largura de banda de 10 nm pode ser usado como alternativa.]
Coluna: Picos de Sódio I – X (% Área do Pico) Coluna de sílica fundida de 50-µm × 50-cm
Temperatura da coluna: 25°
Tensão aplicada: rampa linear de 0,00 a +30,00 kV durante 10 min, depois a 30 kV por mais 20 min
Tamanho da injeção: Volumes iguais a 0,5 psi por 10 s
Adequação do sistema
Amostra: Solução padrão
[NOTA - Consulte a Tabela 6 para obter os tempos de migração relativos aproximados para os picos de betadex sulfobutil éter sódico I – X (os picos de betadex sulfobutil éter sódico I, II, III, ..., X, contém molécula de beta ciclodextrina com 1, 2, 3, ..., 10 substituintes sulfobutílicos, respectivamente). Os tempos de migração relativos são apenas para fins informativos para auxiliar na identificação dos picos.]
Tabela 6

Requisitos de adequação
Resolução: NLT 0,9, entre betadex sulfobutil éter sódico pico IX e betadex sulfobutil éter sódico pico X
Análise
Amostras: Execute eletrólito, água, solução padrão e solução de amostra
Injete a solução padrão e a solução amostra aplicando pressão diferencial de 0,5 psi, equivalente a 34 mbar, por 10 s, seguida de injeção de eletrólito Run a 0,5 psi por 2 s. [NOTA-As injeções de pressão devem ser feitas com um frasco de água ou eletrólito na extremidade de saída do capilar.]
Registre os eletroferogramas e meça as respostas de pico para os picos individuais de betadex sulfobutil éter sódico (I a X). Calcule a área de pico corrigida, AI, para cada pico no eletroferograma:
Área de Pico Corrigida A = Área de Pico x Comprimento Capilar Efetivo (cm) / Tempo de Migração
Normalize as áreas de pico corrigidas apresentando cada uma como uma porcentagem da área total corrigida do envelope de substituição:
Área Nomalizada, NA: A / n∑i=1 Ai x 100
n = nível mais alto de substituição
Determine o grau médio de substituição:
Grau Médio de Substituição = n∑i=1 (Nível de Substituição para Pico x NA) / 100
Critérios de aceitação: 6,2~6,9 para grau médio de substituição
Para cada um dos picos de betadex sulfobutil éter sódico I - X, consulte a faixa limite (% da área do pico) na Tabela 7.
Tabela 7

• PH<791>: 4,0-6,8, em solução a 30% (p/v) em dióxido de carbono-água livre
• DETERMINAÇÃO DE ÁGUA, Método I<921>: NMT 10,0%
REQUISITOS ADICIONAIS
• EMBALAGEM E ARMAZENAGEM: Conservar em recipientes bem fechados e armazenar em temperatura ambiente. Proteja da umidade.
• ROTULAGEM: Rotular indicando seu uso na fabricação de formas farmacêuticas injetáveis.
• PADRÕES DE REFERÊNCIA USP<11>
USP Beta Ciclodextrina RS
USP Betadex Éter Sulfobutílico de Sódio RS
Endotoxina USP RS
Cloreto de Sódio USP RS■1S (NF30)