Cicloserina [68-41-7].
A cicloserina tem uma potência não inferior a 900 µg de C3H6N2O2 por mg.
Embalagem e armazenamento-Conserve em recipientes herméticos.
Padrões de referência USP<11>-
USP Cicloserina RS
Identificação-Dissolva cerca de 1 mg em 10 mL de hidróxido de sódio 0,1 N. A 1 mL da solução resultante adicione 3 mL de ácido acético 1 N e 1 mL de uma mistura, preparada 1 hora antes do uso, de partes iguais de solução de nitroprussiato de sódio (1 em 25) e hidróxido de sódio 4 N: uma cor azul se desenvolve gradualmente.
Produtos de condensação-Sua absortividade (ver Espectrofotometria e Espalhamento de Luz<851>) a 285 nm, determinada em uma solução de hidróxido de sódio 0,1 N contendo 0,40 mg por mL não é superior a 0,80.
Rotação específica<781S>: entre 108° e 114°. Solução teste: 50 mg por mL, em hidróxido de sódio 2 N.
Cristalinidade<695>: atende aos requisitos
pH<791>: entre 5,5 e 6,5, em solução (1 em 10).
Perda por secagem<731>-Seque cerca de 100 mg em frasco capilar com rolha em vácuo a 60°C por 3 horas: não perde mais que 1,0% de seu peso.
Resíduo de ignição<281>: não superior a 0,5%, sendo o resíduo carbonizado umedecido com 2 mL de ácido nítrico e 5 gotas de ácido sulfúrico.
Ensaio -
Tampão fosfato pH 6,8-Prepare conforme indicado em Soluções tampão em Soluções na seção Reagentes, indicadores e soluções.
Fase móvel-Dissolver 0,5 g de 1-decanosulfonato de sódio em 800 mL de água, adicionar 50 mL de acetonitrila e 5 mL de ácido acético glacial e misturar. Ajustar com hidróxido de sódio 1 N para um pH de 4,4. Filtrar e desgaseificar. Faça ajustes se necessário (veja Adequação do Sistema em Cromatografia<621>).
Preparação padrão-Dissolva quantitativamente uma quantidade pesada com precisão de USP Cycloserine RS em tampão fosfato pH 6,8 para obter uma solução com uma concentração conhecida de cerca de 0,4 mg por mL.
Preparação do ensaio-Transferir cerca de 20 mg de Cicloserina, pesados com precisão, para um balão volumétrico de 50 mL, dissolver e diluir com tampão fosfato pH 6,8 até o volume e misturar.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografia<621>)-O cromatógrafo líquido está equipado com um detector de 219-nm e uma coluna de 4,6-mm × 25-cm que contém 5- μm embalagem L1. A taxa de fluxo é de cerca de 1 mL por minuto. A temperatura da coluna é mantida a cerca de 30°. Cromatografe a preparação do Padrão e registe as respostas dos picos conforme indicado no Procedimento: o factor de cauda não é superior a 1,8; e o desvio padrão relativo para injeções replicadas não é superior a 2,0%.
Procedimento-Injete separadamente volumes iguais (cerca de 10 µL) da preparação padrão e da preparação do ensaio no cromatógrafo, registre os cromatogramas e meça as respostas de pico para a cicloserina. Calcule a quantidade, em µg, de C3H6N2O2 em cada mg de Cicloserina tomada pela fórmula:
50.000(C/W)(rU / rS)
em que C é a concentração, em mg por mL, de USP Cicloserina RS na preparação Padrão; W é a quantidade, em mg, de Cicloserina utilizada para preparar a preparação do Ensaio; e rU e rS são as respostas máximas para a cicloserina obtidas a partir da preparação do Ensaio e da preparação Padrão, respectivamente.