Trealose
C12H22O11 342,30
C12H22O11·2H2O 378,33
α-D-Glucopiranosil α-D-glucopiranosídeo.
Anidro [99-20-7].
Diidrato [6138-23-4].
DEFINIÇÃO
A trealose é um dissacarídeo estável e não redutor com duas moléculas de glicose ligadas em uma configuração α,α-1,1. É obtido através da conversão enzimática do amido de qualidade alimentar. Contém NLT 97,0% e NMT 102,0% de C12H22O11, calculado na base anidra.
IDENTIFICAÇÃO
• A. Absorção infravermelha<197K>
•B.
Solução amostra: 400 mg/mL de trealose
Análise: Adicione 0,4 mL de uma solução contendo 1-naftol em álcool 95% (1 em 20) a 1 mL da solução amostra. Adicione suavemente 2 mL de ácido sulfúrico à solução.
Critérios de aceitação: Desenvolve-se uma cor violeta na interface entre as duas soluções.
•C.
Solução de glicina: 40 mg/mL de glicina
Solução amostra: 40 mg/mL de trealose
Análise: Adicione 1 mL de ácido clorídrico diluído a 2 mL da solução amostra. Deixe repousar durante 20 min à temperatura ambiente. Adicione 4 mL de hidróxido de sódio TS e 2 mL da solução de glicina à solução amostra. Aqueça a solução por 10 minutos em água fervente.
Critérios de aceitação: Não se desenvolve uma cor marrom.
ENSAIO
• Procedimento
Fase móvel: Água
Solução padrão: 10 mg/mL de USP Trehalose RS, calculada na base anidra
Solução amostra: 10 mg/mL de trealose, calculada com base anidra
Sistema cromatográfico
(Ver Cromatografia<621>, Adequação do Sistema.)
Modo: LC
Detector: índice de refração
Coluna: 8-mm × 30-cm; embalagem L58
Temperatura
Detector: 40
Coluna: 80
Taxa de fluxo: Ajuste para que o tempo de retenção da trealose seja de cerca de 15 min.
Tamanho da injeção: 20 μL
Adequação do sistema
Amostra: Solução padrão
Requisitos de adequação
Desvio padrão relativo: NMT 2,0%
Análise
Amostras: solução padrão e solução amostral
Calcule a porcentagem de trealose (C12H22O11) na porção de trealose tomada:
Resultado = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = resposta de pico da solução amostra
rS = resposta de pico da solução padrão
CS = concentração de USP Trehalose RS na solução padrão (mg/mL)
CU = concentração de trealose na solução amostra (mg/mL)
Critérios de aceitação: 97,0%-102,0% na base anidra
IMPUREZAS
• Resíduo na ignição<281>: NMT 0,1%, determinado em 2,0 g de trealose
• Metais Pesados, Método I<231>
Amostra: 4,0g
Preparação do monitor: Prepare com 2,5 mL de solução padrão de chumbo.
Critérios de aceitação: NMT 5 ppm
• Substâncias Relacionadas
Fase móvel e sistema cromatográfico: Preparar conforme indicado no Ensaio.
Solução amostra: 10 mg/mL de trealose
Solução padrão: 0,1 mg/mL de solução de amostra
Solução de adequação do sistema: Dissolva 2,5 mL de solução de amostra, 25 mg de maltotriose e 25 mg de glicose e dilua com água até 10,0 mL.
Adequação do sistema
Amostra: Solução de adequação do sistema
[Nota-Os tempos de retenção relativos para maltotriose, trealose e glicose são cerca de 0,9, 1,0 e 1,2, respectivamente.]
Requisitos de adequação
Resolução: NLT 1,5 entre trealose e maltotriose
Desvio padrão relativo: NMT 2,0% para o pico de trealose
Análise
Amostras: Solução amostral e solução padrão
Determine as áreas de pico para todos os picos.
Critérios de aceitação: Para a solução amostra, as áreas de quaisquer picos correspondentes à maltotriose e outros polissacarídeos e eluentes antes da trealose são NMT metade da área do pico correspondente à trealose no cromatograma da solução padrão (0,5%). As áreas de quaisquer picos correspondentes à glicose e eluentes após a trealose são NMT metade da área do pico correspondente à trealose no cromatograma da solução padrão (0,5%).
TESTES ESPECÍFICOS
• Cor e clareza da solução
Solução amostra: 33 g de trealose em 67 g de água recentemente fervida
Análise
Usando um espectrofotômetro adequado (ver Espectrofotometria e Espalhamento de Luz 851), meça as absorvâncias da solução de amostra a 420 e 720 nm em uma cubeta de 10-cm. A absorvância da solução amostra a 720 nm é NMT 0,050.
Determine a diferença de absorbância:
Resultado = A420 A720
A420 = absorbância da solução amostra a 420 nm
A720 = absorbância da solução amostra a 720 nm
Critérios de aceitação: A diferença de absorção é NMT 0,100.
• Rotação óptica, rotação específica<781S>: +197° a +201° a 20
Solução de amostra: 100 mg/mL
• Testes de enumeração microbiana<61>e testes para microrganismos específicos<62>: A contagem microbiana aeróbica total é NMT 100 ufc/g, e a contagem total combinada de bolores e leveduras é NMT 100 ufc/g. Atende aos requisitos dos testes de ausência de espécies de Salmonella e Escherichia coli.
• pH<791>
Solução de amostra: 100 mg/mL
Critérios de aceitação: 4,5-6,5
• Determinação de Água, Método I<921>: Para a forma anidra, NMT 1,0%; para a forma diidratada, 9,0%-11,0%
Amostra: 0,1g
• Teste de Endotoxinas Bacterianas<85>: Se rotulado para uso na preparação de formas farmacêuticas parenterais, também atende aos seguintes requisitos. O nível de endotoxinas bacterianas é tal que o requisito da(s) monografia(s) de forma farmacêutica relevante em que a trealose é utilizada pode ser cumprido. Quando o rótulo indica que a Trealose deve ser submetida a processamento adicional durante a preparação de formas farmacêuticas injetáveis, o nível de endotoxinas bacterianas é tal que o requisito da(s) monografia(s) de forma farmacêutica relevante em que a Trehalose é usada pode ser atendido.
• Cloreto e Sulfato, Cloreto<221>: Uma amostra de 2,0-g não apresenta mais cloreto do que corresponde a 0,70 mL de ácido clorídrico 0,01 M (NMT 0,0125%).
• Cloreto e Sulfato, Sulfato<221>: Uma amostra de 2,0-g não apresenta mais sulfato do que corresponde a 0,83 mL de ácido sulfúrico 0,005 M (NMT 0,0200%).
• Conteúdo de Nitrogênio, Método I<461>
Amostra: 5,0g
Análise: Proceder conforme indicado no Método I, aumentando o ácido sulfúrico utilizado na digestão para 30 mL e reduzindo a solução de hidróxido de sódio (2 em 5) para 45 mL.
Critérios de aceitação: NMT 0,005%
• Amido Solúvel
Solução de amostra: Trealose a 10% (p/v)
Análise: Adicione várias gotas de iodo TS à solução amostra.
Critérios de aceitação: Não se desenvolve nenhuma cor azul.
REQUISITOS ADICIONAIS
• Embalagem e Armazenamento: Conservar em recipientes hermeticamente fechados. Nenhum requisito de armazenamento especificado.
• Rotulagem: Quando a Trehalose se destina ao uso na fabricação de formas farmacêuticas injetáveis, ela é rotulada dessa forma. Quando a trealose deve ser submetida a processamento adicional durante a preparação de formas farmacêuticas injetáveis ​​para garantir níveis aceitáveis ​​de endotoxinas bacterianas, ela é rotulada dessa forma.
• Padrões de referência da USP<11>
Endotoxina USP RS
Glicerina USP RS
USP Trehalose RS