Cloridrato de Gemcitabina
C9H11F2N3O4·HCl 299,66
Citidina, 2′-desoxi-2′,2′-difluro-, monocloridrato.
2′-Desoxi-2′,2′-monocloridrato de difluorocitidina ( β-isômero) [122111-03-9].
» O cloridrato de gencitabina contém não menos que 97,5 por cento e não mais que 101,5 por cento de C9H11F2N3O4·HCl, calculado no estado em que se encontra.
[Cuidado - O cloridrato de gemcitabina é um potente agente citotóxico. Deve-se tomar muito cuidado para evitar a inalação de partículas e a exposição da pele a elas.]
Embalagem e armazenamento-Conserve em recipientes herméticos.
Rotulagem-Quando se destina ao uso na preparação de formas farmacêuticas injetáveis, o rótulo indica que é estéril ou deve ser submetido a processamento adicional durante a preparação de formas farmacêuticas injetáveis.
Padrões de referência USP<11>-
USP Citosina RS
Endotoxina USP RS
Cloridrato de gemcitabina USP RS
Identificação-
A: Absorção infravermelha<197K>.
B: Atende aos requisitos dos testes para Cloreto<191>.
Rotação específica<781S>: entre +43 e +50, em 20.
Solução teste: 10 mg por mL.
pH<791>: entre 2,0 e 3,0, em solução contendo 10 mg por mL.
Resíduo na ignição<281>: não mais que 0,1%.
Metais pesados, Método I<231>: 0,001%.
Pureza cromatográfica -
Solução A- Proceda conforme indicado para a fase móvel do ensaio.
Solução B-Prepare metanol filtrado e desgaseificado.
Fase móvel-Use misturas variáveis ​​de Solução A e Solução B conforme indicado no Sistema cromatográfico. Faça ajustes, se necessário (consulte Adequação do Sistema em Cromatografia 621).
Solução de adequação do sistema-Proceda conforme indicado no Ensaio.
Solução padrão-Dissolva uma quantidade pesada com precisão de Cloridrato de Gemcitabina RS da USP e Citosina RS da USP em água e dilua quantitativamente e gradualmente, se necessário, para obter uma solução com uma concentração conhecida de cerca de 2 µg por mL de cada.
Solução teste-Transferir cerca de 50 mg de Cloridrato de Gemcitabina, pesado com precisão, para um balão volumétrico de 25 mL, dissolver e diluir com água até o volume e misturar.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografia 621)-Proceda conforme indicado em Ensaio. O cromatógrafo é programado da seguinte forma.
Tempo (minutos) Solução A (%) Solução B (%) Eluição
0–8 97 3 isocrático
8–13 97®50 3®50 gradiente linear
13–20 50 50 isocrático
20–25 50®97 50®3 re-equilíbrio
Cromatografe a solução de adequação do sistema e registre as respostas de pico conforme indicado no Procedimento: os tempos de retenção relativos são cerca de 0,5 para o anômero de gencitabina e 1,0 para gencitabina; a resolução, R, entre o anômero de gencitabina e a gencitabina não é inferior a 8,0; e o fator de cauda para gencitabina não é superior a 1,5. Cromatografe a solução padrão e registe as respostas dos picos conforme indicado no Procedimento: os tempos de retenção relativos são cerca de 0,1 para citosina e 1,0 para gemcitabina; o desvio padrão relativo para injeções replicadas não é superior a 2,0%.
Procedimento-Injete separadamente um volume (cerca de 20 µL) da solução padrão e da solução teste no cromatógrafo, registre o cromatograma e meça todas as respostas de pico. Calcule a porcentagem de citosina na porção de Gemcitabina tomada pela fórmula:
2,5(Cc/W)(rt/rs)
em que Cc é a concentração de Citosina RS USP na solução Padrão, em µg por mL; W é o peso, em mg, da Gemcitabina tomada; rt é o pico de resposta da citosina na solução de teste; e rs é a resposta para citosina na solução padrão: não é encontrado mais de 0,1% de citosina. Calcule a porcentagem de cada impureza além da citosina na porção de Gemcitabina tomada pela fórmula:
2,5(Cs/W)(ri/rs)
em que Cs é a concentração de Cloridrato de Gemcitabina RS da USP na solução Padrão, em µg por mL; W é o peso, em mg, da Gemcitabina tomada; ri é o pico de resposta para cada impureza na solução de teste; e rs é a resposta devida à gencitabina na solução padrão: não é encontrado mais de 0,1% de anômero de gencitabina ou qualquer outra impureza individual; e a soma de todas as impurezas não é superior a 0,2%. Excluir da soma de todas as impurezas quaisquer picos que estejam abaixo do limite de quantificação (0,02%).
Outros requisitos-Onde o rótulo afirma que o cloridrato de gemcitabina é estéril, ele atende aos requisitos para endotoxinas bacterianas e esterilidade sob gencitabina para injeção. Onde o rótulo afirma que o cloridrato de gemcitabina deve ser submetido a processamento adicional durante a preparação de formas farmacêuticas injetáveis, ele atende aos requisitos para endotoxinas bacterianas em Gemcitabina para injeção.
Ensaio -
Fase móvel-Prepare uma solução filtrada e desgaseificada contendo 13,8 g de fosfato de sódio monobásico e 2,5 mL de ácido fosfórico em 1000 mL de água. [nota-O pH desta solução está entre 2,4 e 2,6. ]
Solução de adequação do sistema-Transfira cerca de 10 mg de cloridrato de gemcitabina para um frasco pequeno, adicione 4 mL de uma solução contendo 168 mg de hidróxido de potássio por mL de metanol, tampe bem e sonicar. Aquecer a 55ºC por 6 a 16 horas, deixar esfriar e transferir o conteúdo para um balão volumétrico de 100 mL com lavagens sucessivas de ácido fosfórico a 1% (v/v). Diluir com ácido fosfórico a 1% até o volume e misturar. [nota-Esta solução contém cerca de 0,02 mg por mL de gencitabina α-anômero.]
Preparação padrão-Dissolva uma quantidade pesada com precisão de Cloridrato de Gemcitabina RS da USP em água e dilua quantitativamente, e gradualmente, se necessário, com água para obter uma solução com uma concentração conhecida de cerca de 0,1 mg por mL.
Preparação do ensaio-Transferir cerca de 20 mg de Cloridrato de Gemcitabina, pesados ​​com precisão, para um balão volumétrico de 200 mL, dissolver e diluir com água até o volume e misturar.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografia<621>)-O cromatógrafo líquido é equipado com um detector de 275-nm e uma coluna de 4,6-mm × 25-cm que contém empacotamento L7 de 5-µm. A taxa de fluxo é de cerca de 1,2 mL por minuto. Cromatografe a solução de adequação do sistema e registre as respostas de pico conforme indicado no Procedimento: a resolução, R, entre o anômero de gencitabina e a gemcitabina não é inferior a 8,0; e o fator de cauda determinado a partir da gencitabina não é superior a 1,5. Cromatografe a preparação padrão e registre as respostas de pico conforme indicado no Procedimento: o desvio padrão relativo para injeções replicadas não é superior a 1,0%.
Procedimento-Injete separadamente volumes iguais (cerca de 20 µL) da preparação padrão e da preparação do ensaio no cromatógrafo, registre os cromatogramas e meça as respostas para os picos principais. Calcule a quantidade, em mg, de C9H11F2N3O4·HCl na porção de Cloridrato de Gemcitabina tomada pela fórmula:
200C(rU / rS)
em que C é a concentração, em mg por mL, de Cloridrato de Gemcitabina RS da USP na preparação padrão; e rU e rS são as respostas de pico obtidas da preparação do Ensaio e da preparação Padrão, respectivamente.