Dicloridrato de histamina (CAS: 56-92-8) EP9.0 VolumeⅡMétodo de teste
DEFINIÇÃO
O dicloridrato de histamina contém não menos que 98,5 por cento e não mais que o equivalente a 101,0 por cento de dicloridrato de 2-(1H-imidazol-4-il)etan-1-amina, calculado com referência à substância seca.
PERSONAGENS
Pó cristalino branco ou quase branco ou cristais incolores, higroscópico, muito solúvel em água, solúvel em álcool.
IDENTIFICAÇÃO
Primeira identificação: A, D.
Segunda identificação: B, C, D
A. Examinar por espectrofotometria de absorção infravermelha (2.2.24), comparando com o espectro obtido com dicloridrato de histamina CRS. Examine como discos preparados com 1 mg da substância.
B. Examine os cromatogramas obtidos no teste de histidina. A mancha principal no cromatograma obtido com a solução teste (b) é semelhante em posição, cor e tamanho à mancha principal no cromatograma obtido com a solução de referência (a).
C. Dissolver 0,1 g em 7 mL de água R e adicionar 3 mL de uma solução de hidróxido de sódio a 200 g/L R. Dissolver 50 mg de ácido sulfanílico R em uma mistura de 0,1 mL de ácido clorídrico R e 10 mL de água R e adicionar 0,1 mL de solução de nitrito de sódio R. Adicionar a segunda solução à primeira e misturar. Uma cor vermelha é produzida.
D. Dá a reação (a) de cloretos (2.3.1).
TESTES
Solução S. Dissolver 0,5g em dióxido de carbono - água livre R preparada a partir de água destilada R e diluir para 10 mL com o mesmo solvente.
Aparência da solução. A solução S é límpida (2.2.1) e não apresenta coloração mais intensa que a solução de referência Y7 (2.2.2, Método II).
pH (2.2.3). O pH da solução S é 2,85 a 3,60.
Histidina. Examinar por cromatografia em camada fina (2.2.27), usando uma placa G de sílica gel TLC R.
Solução de teste (a). Dissolver 0,5g da substância a ser examinada em água R e diluir para 10 mL com o mesmo solvente.
Solução de teste (b). Diluir 2 mL da solução teste (a) para 10 mL com água R.
Solução de referência (a). Dissolver 0,1 g de dicloridrato de histamina CRS em água R e diluir para 10 mL com o mesmo solvente.
Solução de referência (b). Dissolver 50 mg de monocloridrato de histidina R em água R e diluir para 100 mL com o mesmo solvente.
Solução de referência (c). Misture 1 mL de solução de teste (a) e 1 mL de solução de referência (b).
Aplicar na placa 1 μL de solução teste (a), 1 μL de solução teste (b), 1 μL de solução de referência (a), 1 μL de solução de referência (b) e 2 μL de solução de referência (c). Desenvolver num percurso de 15cm utilizando uma mistura de 5 volumes de amônia concentrada R, 20 volumes de água R e 75 volumes de acetonitrila R. Secar a placa em corrente de ar. Repita a revelação na mesma direção, seque a placa em uma corrente de ar e pulverize com solução de ninidrina R1. Aquecer a placa a 110°C por 10 min. Qualquer mancha correspondente à histidina no cromatograma obtido com a solução teste (a) não é mais intensa que a mancha no cromatograma obtido com a solução de referência (b) (1 por cento). O teste não é válido a menos que o cromatograma obtido com a solução de referência (c) mostre 2 pontos claramente separados.
Sulfatos (2.4.13). 3mL de solução S diluídos para 15 mL com água destilada R atendem ao teste limite para sulfatos (0,1 por cento).
Perda por secagem (2.2.32). Não superior a 0,5 por cento, determinado em 0,20 g por secagem em estufa a 105 °C.
Cinza sulfatada (2.4.14). Não mais que 0,1 por cento, determinado em 0,5 g.
ENSAIO
Dissolver 0,080 g em uma mistura de 5,0 mL de ácido clorídrico 0,01 M e 50 mL de álcool R. Efetuar a titulação potenciométrica (2.2.20), utilizando hidróxido de sódio 0,1 M. Leia o volume adicionado entre o primeiro e o terceiro pontos de inflexão.
1mL de hidróxido de sódio 0,1 M equivale a 9,203 mg de C5H11Cl2N3.
ARMAZENAMENTO
Armazenar em recipiente hermético, protegido da luz.