Farmacopéia Japonesa Padrões de Referência
L-Glutamina [56-85-9]
L-Glutamina, quando seca, contém não menos que 99,0% e não mais que 101,0% de L-Glutamina (C5H10N2O3).
Descrição L-Glutamina ocorre na forma de cristais brancos ou em pó cristalino. Tem um leve sabor característico
É livremente solúvel em ácido fórmico, solúvel em água e praticamente insolúvel em etanol (99,5)
Identificação Determine o espectro de absorção infravermelha de L-Glutamina conforme indicado no método do disco de brometo de potássio sob espectrofotometria infravermelha <2,25> e compare o espectro com o espectro de referência: ambos os espectros exibem intensidades de absorção semelhantes nos mesmos números de onda.
Rotação Óptica<2,49>[a]20D:+6,3° a +7,3° Pesar com precisão cerca de 2 g de L-Glutamina, previamente seca, adicionar 45mL de água, aquecer a 40℃para dissolver, e após esfriar, adicionar água para perfazer exatamente 50 mL. Determine a rotação óptica desta solução em uma célula de 100-mm, em 60 minutos.
pH<2,54>O pH de uma solução preparada dissolvendo 1,0 g de L-Glutamina em 50 mL de água está entre 4,5 e 6,0.
Pureza
(1) Clareza e cor da solução - Uma solução obtida pela dissolução de 0,5 g de L-Glutamina em 20 mL de água é límpida e incolor.
(2) Cloreto<1,03>—Realizar o teste com 0,5 g de L-Glutamina. Prepare a solução de controle com 0,30 mL de ácido clorídrico VS 0,01 mol/L (não mais que 0,021%).
(3) Sulfato<1,14> – Realize o teste com 0,6 g de L-Glutamina. Prepare a solução de controle com 0,35 mL de ácido sulfúrico VS 0,005 mol/L (não mais que 0,028z).
(4) Amônio<1,02> - Realizar o teste com 0,10 g de L-Glutamina, utilizando a destilação sob pressão reduzida. Prepare a solução controle com 10,0 mL de solução padrão de amônio. A temperatura do banho-maria é de 45°C (não mais que 0,1%)
(5) Metais Pesados<1,07> - Proceder com 1,0 g de L-Glutamina conforme Método 1 e realizar o teste. Prepare a solução controle com 1,0 mL de solução padrão de chumbo (não mais que 10 ppm).
(6) Ferro<1,10>—Prepare a solução de teste com 1,0 g de L-Glutamina de acordo com o Método 1 e realize o teste de acordo com o Método A. Prepare a solução de controle com 1,0 mL de Solução Padrão de Ferro (não mais que 10 ppm)
(7) Substâncias Relacionadas – Dissolva 0,10 g de L-Glutamina em 10 mL de água e use esta solução como solução de amostra. Pipete 1 mL da solução de amostra e adicione água para perfazer exatamente 10 mL. Pipete 1 mL desta solução, adicione água para perfazer exatamente 50 mL e use esta solução como solução padrão. Execute o teste com essas soluções conforme indicado em Cromatografia em camada fina<2.03>. Coloque 5mL de cada solução amostra e solução padrão em uma placa de sílica gel para cromatografia em camada fina. Em seguida, revele com uma mistura de 1-butanol, água e ácido acético (100) (3:1:1) a uma distância de cerca de 10 cm, e seque a placa a 80°C por 30 minutos. Pulverize uniformemente uma solução de ninidrina em uma mistura de metanol e ácido acético (100) (97:3) (1 em 100) na placa e aqueça a 80°C por 10 minutos: o ponto diferente do ponto principal obtido com a solução de amostra não é mais intenso que o ponto obtido com a solução padrão.
Perda na secagem<2,41>Não superior a 0,3% (1 g, 105°C, 3 horas)
Resíduo na ignição<2,44>Não mais que 0,10%(1 g).
Ensaio Pesar com precisão cerca de 0,15 g de L-Glutamina, previamente seca, dissolver em 3 mL de ácido fórmico, adicionar 50 mL de ácido acético (100) e titular<2,50>com ácido perclórico 0,1 mol/L VS (titulação potenciométrica). Execute uma determinação em branco da mesma maneira e faça as correções necessárias.
Cada mL de ácido perclórico 0,1 mol/L VS = 14,61 mg de C5H10N2O3
Recipientes e recipientes de armazenamento – recipientes apertados.

Padrões de referência da USP<11>-USP Glutamina RS.
Identificação, Absorção infravermelha<197K>.
Rotação Específica<781S>: entre +6,3° e +7,3°, determinado a 20°C
Solução de teste - Num frasco adequado, prepare com precisão uma solução de cerca de 40 mg por ml em água a cerca de 40 ℃. Resfrie e dilua com água até o volume antes de usar.
Perda na secagem<731>-Seque a 105°C por 3 horas; não perde mais de 0,20% do seu peso.
Resíduos na ignição<281>Não mais que 0,30%
Cloreto<221>-Uma porção de 0,7-g não apresenta mais cloreto do que corresponde a 0,50ml de ácido clorídrico 0,020 N: não é encontrado mais de 0,05%.
Sulfato<221>-Uma porção de 0,8-g não apresenta mais sulfato do que corresponde a 0,25ml de ácido sulfúrico 0,020 N: não é encontrado mais que 0,03%.
Pureza Cromatográfica
Adsorvente: camada de 0,25-mm de mistura cromatográfica de sílica gel.
Solução de teste: 10 mg por ml, em água
Solução Padrão-Prepare uma solução de Glutamina RS USP em água com uma concentração conhecida de cerca de 0,05mg por ml.
Volume de aplicação: 5μL
Sistema Solvente Revelador: uma mistura de álcool butílico, água e ácido acético glacial (3:1:1).
Reagente Spray-Dissolver 0,2g de ninidrina em 100ml de uma mistura de álcool butílico e ácido acético 2 N (95:5)
Procedimento-Proceda conforme indicado para cromatografia em camada fina em Cromatografia<621> e, em seguida, seque a placa a 80°C por 30 minutos. Pulverize a placa com o reagente de pulverização, aqueça a 80°C por 10 minutos e examine sob luz branca: nenhuma mancha secundária no cromatograma obtido da solução de teste é maior ou mais intensa que a mancha principal no cromatograma obtido da solução padrão (0,5%)
Impurezas Orgânicas Voláteis, Método I<467>: Atender aos requisitos.
Assy-Transferir cerca de 150mg de Glutamina, ponderada com precisão, para um frasco de 125ml, dissolver em 3ml de ácido fórmico e 50ml de ácido acético glacial e titular com ácido perclórico 0,1 N VS determinando o ponto final potenciometricamente. Realize uma determinação em branco e faça as correções necessárias (ver Titrimetria<541>). Cada ml de ácido perclórico 0,1 N equivale a 14,615 mg de C5H10N2O3