L-Prolina (H-Pro-OH) (CAS: 147-85-3) Método de teste AJI 97
Identificação: Compare o espectro de absorção infravermelho da amostra com o padrão pelo método do disco de brometo de potássio.
Rotação Específica [α]20/D: Amostra Seca, C=4, H2O
Estado da Solução (Transmitância): 1,0g em 10ml de H2O, espectrofotômetro, 430nm, espessura de célula de 10mm.
Cloreto (Cl): 0,7g, A-1, ref: 0,40ml de 0,01mol/L HCl
Amônio (NH4): B-1
Sulfato (SO4): 1,2g, (1), ref: 0,50ml de 0,005mol/L H2SO4
Ferro (Fe): 1,5g, ref: 1,5ml de Ferro Padrão. (0,01 mg/ml)
Metais Pesados ​​(Pb): 2,0g, (1), ref: 2,0ml de Pb Std. (0,01 mg/ml)
Arsênico (As2O3): 2,0g, (1), ref: 2,0ml de As2O3 Std.
Outros aminoácidos: Amostra de teste: 30μg, B-6-a
Perda na secagem: a 105°C por 3 horas.
Ensaio: Amostra seca, 120mg, (1), 3ml de ácido fórmico, 50ml de ácido acético glacial, 0,1mol/L HCLO4 1ml=11,513mg C5H9NO2
Teste de pH: 1,0g em 10ml de H2O

L-Prolina (H-Pro-OH) (CAS: 147-85-3) Método de teste USP35
DEFINIÇÃO
A prolina contém NLT 98,5% e NMT 101,5% de L-Prolina (C5H9NO2), calculado na base seca.
IDENTIFICAÇÃO
A. ABSORÇÃO INFRAVERMELHA<197K>
ENSAIO
PROCEDIMENTO
Amostra: 110 mg de Prolina
Branco: Misture 3 mL de ácido fórmico e 50 mL de ácido acético glacial.
Sistema titulométrico
(Ver Titrimetria<541>)
Modo: titulação direta
Titulante: ácido perclórico 0,1 N VS
Detecção de endpoint: potenciométrico
Análise: Dissolver a Amostra em 3 mL de ácido fórmico e 50mL de ácido acético glacial. Titule com o Titulante. Execute a determinação em branco.
Calcule a porcentagem de Prolina (C5H9NO2) na amostra colhida:
Resultado = {[(VS-VB) x N x F]/W} x100
VS= volume de titulante consumido pela amostra (mL)
VB= volume de titulante consumido pelo branco (mL)
N= normalidade real do titulante (mEq/mL)
F= fator de equivalência, 115,1 mg/mEq
W= Peso da amostra (mg)
Critérios de aceitação: 98,5%~101,5% na base seca
IMPUREZAS
RESÍDUO NA IGNIÇÃO<281>: NMT 0,4%
CLORETO E SULFATO, Cloreto<221>
Solução padrão: 0,50mL de ácido clorídrico 0,020 N
Amostra: 0,73g de Prolina
Critérios de aceitação: NMT 0,05%
CLORETO E SULFATO, Sulfato<221>
Solução padrão: 0,10mL de ácido sulfúrico 0,020 N
Amostra: 0,33g de Prolina
Critérios de aceitação: NMT 0,03%
FERRO<241>: NMT 30ppm
METAIS PESADOS, Método I<231>: NMT 15ppm
COMPOSTOS RELACIONADOS
Solução de adequação do sistema: 0,4mg/mL de USP L-Prolina RS e USP L-Treonina RS em ácido clorídrico 0,1 N
Solução padrão: 0,05 mg/mL de USP L-Proline RS em ácido clorídrico 0,1 N. [NOTA-Esta solução tem uma concentração equivalente a 0,5% da solução amostra.]
Solução amostra: 10 mg/mL de Prolina em ácido clorídrico 0,1 N
Sistema cromatográfico
(Veja Cromatografia<621>, Cromatografia em Camada Fina.)
Modo: TLC
Adsorvente: camada de 0,25 mm de mistura cromatográfica de sílica gel
Volume de aplicação: 5μL
Sistema solvente em desenvolvimento: Álcool butílico, ácido acético glacial e água (3:1:1)
Reagente spray: 2 mg/mL de ninidrina em uma mistura de álcool butílico e ácido acético 2N (95:5)
Adequação do sistema
Requisitos de adequação: O cromatograma da solução de adequação do sistema apresenta dois pontos claramente separados.
Análise
Amostras: Solução de adequação do sistema, Solução padrão e Solução de amostra.
Após secar a placa ao ar, borrife com reagente Spray e aqueça entre 100° e 105° por 15 min. Examine a placa sob luz branca.
Critérios de aceitação: Qualquer mancha secundária da solução Amostra não é maior ou mais intensa que a mancha principal da solução Padrão.
Impurezas individuais: NMT 0,5%
Impurezas totais: NMT 2,0%
TESTES ESPECÍFICOS
ROTAÇÃO ÓPTICA, Rotação Específica<781S>
Solução de amostra: 40 mg/mL em água
Critérios de aceitação: -84,3° a -86,3°
SECAGEM POR PERDA<731>: Seque uma amostra a 105°C por 3 h: ela perde NMT 0,4% de seu peso.
REQUISITOS ADICIONAIS
EMBALAGEM E ARMAZENAGEM: Conservar em recipientes bem fechados.
PADRÕES DE REFERÊNCIA USP<11>
USP L-Prolina RS
USP L-Treonina RS