Levetiracetam
C8H14N2O2 170,21
1-Pirrolidinaacetamida, -etil-2-oxo-, (S)-;
()-(S)--Etil-2-oxo-1-pirrolidinaacetamida [102767-28-2].
DEFINIÇÃO
Levetiracetam contém NLT 98,0% e NMT 102,0% de C8H14N2O2, calculado na base anidra e livre de solvente.
IDENTIFICAÇÃO
• A. Absorção infravermelha<197K>
• B. O tempo de retenção do pico principal do levetiracetam da solução de amostra corresponde ao do enantiômero S-de levetiracetam da solução de adequação do sistema, conforme obtido no teste de Limite do Enantiômero R-de Levetiracetam.
ENSAIO
• Procedimento
Tampão: 2,7 g/L de fosfato de potássio monobásico em água. Ajustar com hidróxido de potássio aquoso a 2% (p/v) para um pH de 5,5.
Solução A: Acetonitrila e Tampão (1:19)
Solução B: Acetonitrila
Fase móvel: Veja a tabela de gradiente abaixo.
Tempo (min) Solução A (%) Solução B (%)
0 100 0
3 100 0
20 71 29
Solução de adequação do sistema: 0,2 mg/mL de USP Levetiracetam RS e 0,08 mg/mL de USP Levetiracetam Composto A RS na Solução A. Prepare dissolvendo primeiro a quantidade necessária de USP Levetiracetam RS em um balão volumétrico adequado. Adicione 10% do volume do frasco de hidróxido de potássio 0,1 N. Deixe a mistura reagir à temperatura ambiente durante cerca de 15 min e depois neutralize adicionando ácido clorídrico 0,1 N a 10% do volume do frasco. Adicione a quantidade necessária de Composto A RS relacionado ao levetiracetam USP, sonicar para dissolver, diluir com a Solução A até o volume e misturar.
Solução padrão: 0,1 mg/mL de Levetiracetam RS USP na Solução A
Solução amostra: 0,1 mg/mL de Levetiracetam na Solução A
Sistema cromatográfico
(Ver Cromatografia<621>, Adequação do Sistema.)
Modo: LC
Detector: UV 205 nm
Coluna: 4,6-mm × 15-cm; embalagem L1
Taxa de fluxo: 0,9 mL/min
Tamanho da injeção: 10 μL
Adequação do sistema
Amostra: Solução de adequação do sistema
[Nota-Os tempos de retenção relativos são fornecidos na Tabela de Impureza 1.]
Requisitos de adequação
Desvio padrão relativo: NMT 1,0%
[Nota-Se os critérios de adequação do sistema não puderem ser atendidos, recomenda-se que a temperatura da coluna seja mantida em 20ºC para estabilizar o sistema.]
Análise
Amostras: solução padrão e solução amostral
Calcule a porcentagem de C8H14N2O2 na porção de Levetiracetam tomada:
Resultado = [(rU/rS) × (CS/CU) × 100] F
rU = resposta máxima do levetiracetam da solução amostra
rS = resposta máxima do levetiracetam da solução padrão
CS = concentração de Levetiracetam RS USP na solução padrão (mg/mL)
CU = concentração de Levetiracetam na solução amostra (mg/mL)
F = porcentagem de enantiômero R-de levetiracetam do teste para Limite de enantiômero R-de Levetiracetam
Critérios de aceitação: 98,0%-102,0% na base anidra e livre de solventes
IMPUREZAS
Impurezas Inorgânicas
• Resíduo na ignição<281>: NMT 0,1%
• Metais Pesados, Método II<231>: 20 ppm
Impurezas Orgânicas
• Procedimento 1: Limite do Composto B Relacionado ao Levetiracetam
[Nota-Realize este teste apenas se o composto B relacionado ao levetiracetam for uma impureza de processo conhecida.]
Tampão: 1,22 g de 1-decanosulfonato de sódio em 1 L de água contendo cerca de 1,3 mL de ácido fosfórico. Ajuste com hidróxido de potássio a 20% (p/v) para um pH de 3,0.
Fase móvel: Acetonitrila e Tampão (3:17)
Solução de adequação do sistema: 2 mg/mL de Composto B RS relacionado ao levetiracetam da USP na fase móvel
Solução padrão: 0,002 mg/mL de Composto B RS relacionado ao levetiracetam da USP na fase móvel
Solução amostra: 2,0 mg/mL de Levetiracetam em Fase Móvel
Sistema cromatográfico
(Ver Cromatografia 621, Adequação do Sistema.)
Modo: LC
Detector: UV 200nm
Coluna: 4,6-mm × 25-cm; embalagem L1
Taxa de fluxo: 1,0 mL/min
Tamanho da injeção
Adequação do sistema: 10 μL
Análise: 50 µL
Adequação do sistema
Amostra: Solução de adequação do sistema
[Nota-O tempo de retenção do composto B relacionado ao levetiracetam é de 9 min.]
Requisitos de adequação
Fator de cauda: NMT 3.0
[Nota-Se for observada uma cauda significativa do pico do composto B relacionado ao levetiracetam (maior que 3,0), recomenda-se que a temperatura da coluna seja mantida em 27ºC para estabilizar o sistema.]
Desvio padrão relativo: NMT 2,0%
Análise
Amostras: solução padrão e solução amostral
Calcule a porcentagem do composto B relacionado ao levetiracetam na porção de Levetiracetam tomada:
Resultado = (rU/rS) × (CS/CU) × (Mr1/Mr2) × 100
rU = resposta de pico do composto B relacionado ao levetiracetam da solução amostra
rS = resposta de pico do composto B relacionado ao levetiracetam da solução padrão
CS = concentração de Composto B RS relacionado ao levetiracetam USP na solução padrão (mg/mL)
CU = concentração de Levetiracetam na solução amostra (mg/mL)
Mr1 = peso molecular da base livre do composto B relacionado ao levetiracetam, 102,1
Mr2 = peso molecular do composto B relacionado ao levetiracetam, 138,6
Critérios de aceitação: NMT 0,10%
[Nota-A quantidade de composto B relacionado ao levetiracetam medida deve ser incluída no total de impurezas no teste para Impurezas Orgânicas, Procedimento 2.]
• Procedimento 2
Tampão, Solução A, Solução B, Fase Móvel, Solução de Adequação do Sistema e Sistema Cromatográfico: Proceda conforme indicado no Ensaio.
Solução padrão: 0,005 mg/mL de Levetiracetam RS USP na Solução A
Solução amostra: 5 mg/mL de Levetiracetam na Solução A
Análise
Amostras: solução padrão e solução amostral
Calcule a porcentagem de cada impureza na porção de Levetiracetam tomada:
Resultado = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = resposta de pico de cada impureza da solução amostral
rS = resposta máxima do levetiracetam da solução padrão
CS = concentração de Levetiracetam RS USP na solução padrão (mg/mL)
CU = concentração de Levetiracetam na solução amostra (mg/mL)
F = fator de resposta relativo (ver Tabela de Impureza 1)
[Nota-Desconsidere qualquer pico com um tempo de retenção relativo de 0,19 ou menos.]
Critérios de aceitação
Impurezas individuais: Consulte a Tabela de Impurezas 1.
Impurezas totais: NMT 0,4%
Tabela de Impureza 1
Nome Critérios de aceitação do fator de resposta relativo do tempo de retenção relativo, NMT (%)
Piridina-2-ol a 0,37 1,0 0,025
Levetiracetam ácidob 0,62 1,2 0,3
Levetiracetam 1,00 - -
Composto relacionado ao levetiracetam Ac 1,25 0,35 0,05
Qualquer impureza individual não especificada - 1,0 0,05
a Não incluído no limite Total de impurezas.
ácido b (S)-2-(2-Oxopirrolidina-1-il)butanóico. Incluído no limite Total de impurezas.
c (S)-N-(1-Amino-1-oxobutan-2-il)-4-clorobutanamida. Incluído no limite de impurezas totais apenas se o composto B relacionado ao levetiracetam for uma impureza de processo conhecida.
TESTES ESPECÍFICOS
• Determinação de Água, Método Ia<921>: NMT 0,5%
• Limite de Levetiracetam R-Enantiômero
Fase móvel: n-Hexano e álcool desidratado (4:1)
Solução de adequação do sistema: 0,1 mg/mL de USP Levetiracetam Racemic Mixture RS em fase móvel
Solução padrão: 0,05 mg/mL de Levetiracetam RS USP em fase móvel
Solução amostra: 10 mg/mL de Levetiracetam em Fase Móvel
Sistema cromatográfico
(Ver Cromatografia<621>, Adequação do Sistema.)
Modo: LC
Detector: UV 215nm
Coluna: 4,6-mm × 25-cm; Embalagem de 10-µm L51
Taxa de fluxo: 1,0 mL/min
Tamanho da injeção: 20 μL
Adequação do sistema
Amostra: Solução de adequação do sistema
[Nota-Os tempos de retenção relativos para o enantiômero R-de levetiracetam e o enantiômero S-de levetiracetam são 0,55 e 1,0, respectivamente.]
Requisitos de adequação
Resolução: NLT 4.0 entre o R- e S-enantiômeros
[Nota-Se for observada uma perda de resolução (menos de 4,0), recomenda-se que a temperatura da coluna seja mantida em 25ºC para estabilizar o sistema.]
Análise
Amostras: solução padrão e solução amostral
Calcule a porcentagem de enantiômero R - de levetiracetam na porção de Levetiracetam tomada:
Resultado = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = resposta de pico do enantiômero R-de levetiracetam da solução amostra
rS = resposta máxima do levetiracetam da solução padrão
CS = concentração de Levetiracetam RS USP na solução padrão (mg/mL)
CU = concentração de Levetiracetam na solução amostra (mg/mL)
Critérios de aceitação: NMT 0,8%
REQUISITOS ADICIONAIS
• Embalagem e Armazenamento: Conservar em recipientes bem fechados e armazenar em temperatura ambiente.
• Padrões de referência da USP<11>
USP Levetiracetam RS
Mistura racêmica de levetiracetam USP RS
Uma mistura 1:1 de levetiracetam S-enatiomer-(2S)-2-(2-oxopirrolidin-1-yl)butanamida e levetiracetam R-enantiômero (2R)-2-(2-oxopirrolidin-1-yl)butanamida.
Composto A RS relacionado ao levetiracetam da USP
(S)-N-(1-Amino-1-oxobutan-2-il)-4-clorobutanamida.
C8H14ClNO3 207,65
Composto B RS relacionado ao levetiracetam da USP
(S)-2-Cloridrato de aminobutanamida.
C4H10N2O·HCl 138,6