Fluorouracila
C4H3FN2O2 130,08
2,4(1H,3H)-Pirimidinadiona, 5-flúor-;
5-Fluorouracila [51-21-8]; UNII: U3P01618RT.
DEFINIÇÃO
Fluorouracila contém NLT 98,0% e NMT 102,0% de fluorouracil (C4H3FN2O2), calculado com base seca.
[ CUIDADO- Deve-se tomar muito cuidado para evitar a inalação de partículas de Fluorouracil e a exposição da pele a ele.]
IDENTIFICAÇÃO
Mude para ler:
• A. TESTES DE IDENTIFICAÇÃO ESPECTROSCÓPICA<197>, Espectroscopia de Infravermelho: 197M (CN 1-MAIO-2020)
Mude para ler:
• B. TESTES DE IDENTIFICAÇÃO ESPECTROSCÓPICA<197>, Espectroscopia Ultravioleta-Visível: 197U (CN 1-MAIO-2020)
Meio: tampão acetato de pH 4,7 preparado a partir de 8,4 g de acetato de sódio e 3,35 mL de ácido acético glacial misturado com água para perfazer 1000 mL
Solução amostra: 10 µg/mL em meio
Critérios de aceitação: Atende aos requisitos
• C. O tempo de retenção do pico maior da solução Amostra corresponde ao da solução Padrão, conforme obtido no Ensaio.
ENSAIO
• PROCEDIMENTO
Tampão: 6,8 g/L de fosfato de potássio monobásico em água. Ajustar com hidróxido de potássio 5 M para um pH de 5,7 ± 0,1.
Fase móvel: Acetonitrila e Tampão (5:95)
Solução padrão: 10 µg/mL de USP Fluorouracil RS em água
Solução amostra: 10 µg/mL de Fluorouracil em água
Sistema cromatográfico
(Ver Cromatografia<621>, Adequação do Sistema.)
Modo: LC
Detector: UV 254nm
Coluna: 4,6-mm × 25-cm; Embalagem L1 de 5-µm
Taxa de fluxo: 1,0 mL/min
Volume de injeção: 20 μL
Adequação do sistema
Amostra: Solução padrão
Requisitos de adequação
Desvio padrão relativo: NMT 0,73%, solução padrão
Fator de cauda: NMT 1.5, solução padrão
Análise
Amostras: solução padrão e solução amostral
Calcule a porcentagem de uorouracila (C4H3FN2O2) na porção de Fluorouracila tomada:
Resultado = (ru /rs) × (Cs /Cu) × 100
ru = resposta de pico da solução de amostra
rs = resposta de pico da solução padrão
Cs = concentração de Fluorouracil RS USP na solução padrão (µg/mL)
Cu = concentração de Fluorouracil na solução amostra (µg/mL)
Critérios de aceitação: 98,0%-102,0% na base seca
IMPUREZAS
• RESÍDUO NA IGNIÇÃO<281>: NMT 0,1%
• IMPUREZAS ORGÂNICAS
Proteja a solução padrão e a solução amostra da luz.
Fase móvel: 6,8 g/L de fosfato de potássio monobásico em água. Ajustar com hidróxido de potássio 5 M para um pH de 5,7 ± 0,1.
Solução padrão: 0,1 µg/mL de cada USP Fluorouracil RS, USP Fluorouracil Related Compound A RS, USP Fluorouracil Related
Composto B RS e USP Uracil RS e 0,2 µg/mL de Composto E RS relacionado ao fluorouracil USP na fase móvel
Solução amostra: 0,1 mg/mL de Fluorouracil em fase móvel
Sistema cromatográfico
(Ver Cromatografia<621>, Adequação do Sistema.)
Modo: LC
Detector: UV 266nm
Coluna: 4,6-mm × 25-cm; Embalagem L1 de 5-µm
Taxa de fluxo: 1,0 mL/min
Volume de injeção: 20 μL
Tempo de execução: NLT 3 vezes o tempo de retenção do pico de uorouracila
Adequação do sistema
Amostra: Solução padrão
Requisitos de adequação
Resolução: NLT 2 entre os picos de uracila e uorouracila
Análise
Amostras: solução padrão e solução amostral
Calcule a porcentagem de composto A relacionado ao uorouracila, composto B relacionado ao uorouracila e uracila na porção de
Fluorouracila tomada:
Resultado = (ru /rs) × (Cs /Cu) × 100
ru = resposta de pico do composto relacionado ao uorouracil relevante da solução amostra
rs = resposta de pico do composto relacionado ao uorouracil relevante da solução padrão
Cs = concentração do composto relacionado ao uorouracil relevante na solução padrão (mg/mL)
Cu = concentração de Fluorouracil na solução amostra (mg/mL)
Calcule a porcentagem de 5 - metoxiuracil, composto E relacionado ao uorouracil e qualquer impureza não especificada na porção de
Fluorouracila tomada:
Resultado = (ru /rs) × (Cs /Cu) × (1/F) × 100
ru = resposta de pico de cada impureza da solução amostral
rs = resposta de pico de uorouracil da solução padrão
Cs = concentração de Fluorouracil RS USP na solução padrão (mg/mL)
Cu = concentração de Fluorouracil na solução amostra (mg/mL)
F = fator de resposta relativo para cada impureza individual (ver Tabela 1)
Critérios de aceitação: Ver Tabela 1. Desconsiderar quaisquer picos de impureza inferiores a 0,05%.
Tabela 1
Nome Critérios de aceitação do fator de resposta relativo do tempo de retenção relativo, NMT (%)
Composto A relacionado ao fluorouracil A a 0,5 – 0,15
Composto relacionado ao fluorouracil B b 0,7 – 0,15
Uracila 0,9 – 0,15
Nome Critérios de aceitação do fator de resposta relativo do tempo de retenção relativo, NMT (%)
Fluorouracila 1.0 – -
5-Metoxiuracil c 1,6 0,67 0,15
Composto relacionado ao fluorouracil E d 1,9 0,77 0,15
Qualquer impureza individual não especificada – 1,0 0,10
Impurezas totais – - 0,5
  uma Pirimidina-2,4,6(1H,3H,5H)-triona.
  b Dihidropirimidina-2,4,5(3H)-triona.
  c 5-Metoxipirimidina-2,4(1H,3H)-diona.
  d 5-Cloropirimidina-2,4(1H,3H)-diona.
• LIMITES DO COMPOSTO F RELACIONADO COM FLUOROURACIL E UREIA
Diluente: Metanol e água (1:1)
Solução padrão A: 0,025 mg/mL de composto relacionado ao fluorouracil USP F RS em diluente
Solução padrão B: 0,02 mg/mL de USP Ureia RS em metanol
Solução amostra: 10 mg/mL de Fluorouracil em Diluente
Sistema cromatográfico
(Veja Cromatografia<621>, Cromatografia em Camada Fina.)
Modo: TLC
Adsorvente: Mistura cromatográfica de sílica gel
Volume de aplicação: 10 µL
Sistema solvente em desenvolvimento: acetato de etila, metanol e água (70:15:15)
Reagente: Prepare uma solução 10mg/mL de p-dimetilaminobenzaldeído em álcool anidro. Prepare uma mistura desta solução
e ácido clorídrico (10:1).
Análise
Amostras: Solução padrão A, Solução padrão B e Solução de amostra
Procedimento: Revelar com sistema solvente revelador, seguido de secagem ao ar. Examine a placa sob luz UV a 254 nm para
composto F relacionado ao uorouracil. Pulverize a placa pelo menos duas vezes com Reagente e seque a placa em uma estufa a 80° por 3–4 min.
Examine a placa à luz do dia em busca de uréia. [NOTA- A uréia produz uma mancha amarela e o uorouracil não é detectado pelo spray.]
Critérios de aceitação: A mancha do composto F relacionado ao uorouracil na solução da amostra não é mais intensa que a mancha do
composto F relacionado ao uorouracil da solução padrão A (NMT 0,25%). A mancha de uréia na solução amostra não é mais
intensa que a mancha de uréia da solução padrão B (NMT 0,2%).
TESTES ESPECÍFICOS
• PERDA NA SECAGEM<731>
Análise: Secar sob vácuo sobre pentóxido de fósforo a 80° durante 4 h.
Critérios de aceitação: NMT 0,5%
REQUISITOS ADICIONAIS
• EMBALAGEM E ARMAZENAGEM: Conservar em recipientes herméticos e resistentes à luz.
• PADRÕES DE REFERÊNCIA USP<11>
USP Fluorouracila RS
Composto A RS relacionado ao fluorouracil USP
Pirimidina-2,4,6(1H,3H,5H)-triona.
C4H4N2O3 128,09
Composto B RS relacionado ao fluorouracil USP
Dihidropirimidina-2,4,5(3H)-triona.
C4H4N2O3 128,09
Composto E RS relacionado ao fluorouracil USP
5-Cloropirimidina-2,4(1H,3H)-diona.
C4H3ClN2O2 146,53
Composto relacionado ao fluorouracil USP F RS
2-Etoxi-5-uoropirimidin-4(1H)-ona.
C6H7FN2O2 158,13
USP Uracil RS
Uracila.
C4H4N2O2 112,09