Paclitaxel
C47H51NO14 853,91
Ácido benzenopropanóico, -(benzoilamino)--hidroxi-, 6,12b-bis(acetiloxi)-12-(benzoiloxi)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b-dodecahidro-4,11-d ihidroxi-4a,8,13,13-tetrametil-5-oxo-7,11-metano-1H-ciclodeca[3,4]benz[1,2-b]oxet-9-il éster, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Dodecahidro-4,6,9,11,1 2,12b-hexahidroxi-4a,8,13,13-tetrametil-7,11-metano-5H-ciclodeca[3,4]-benz[1,2-b]oxet-5-ona 6,12b-diacetato, 12-benzoato, 9-éster com (2R,3S)-N-benzoil-3-fenilisoserina [33069-62-4].
O paclitaxel contém não menos que 97,0 por cento e não mais que 102,0 por cento de C47H51NO14, calculado com base anidro, livre de solvente.
[Cuidado-Paclitaxel é citotóxico. Deve-se tomar muito cuidado para evitar a inalação de partículas de Paclitaxel e a exposição da pele a ele.]
Embalagem e armazenamento-Conserve em recipientes hermeticamente fechados e resistentes à luz e armazene em temperatura ambiente controlada.
Rotulagem-A rotulagem indica o tipo de processo utilizado para produzir o material e o teste de compostos relacionados com o qual o material está em conformidade.
Padrões de referência USP<11>-
Endotoxina USP RS
USP Paclitaxel RS Clique para visualizar a estrutura
Composto A RS relacionado ao paclitaxel da USP
Cefalomanina.
Composto B RS relacionado ao paclitaxel da USP
10-Desacetil-7-Epipaclitaxel.
Mistura RS de impurezas de paclitaxel USP
Mistura de Paclitaxel e os seguintes compostos relacionados: análogo de propila, cefalomanina, análogo de sec-butila, análogo de n-butila, análogo de benzila, bacatina VI, análogo de pentila e 7-epipaclitaxel.
Identificação-
A: Absorção infravermelha<197K>.
B: O tempo de retenção do pico principal no cromatograma da preparação do Ensaio corresponde ao cromatograma da preparação Padrão, conforme obtido no Ensaio.
Rotação específica 781S: entre 49,0 e 55,0 a 20, calculada na base anidra, sem solventes.
Solução teste: 10 mg por mL, em metanol.
Testes de enumeração microbiana<61>e testes para microrganismos específicos<62>-A contagem microbiana aeróbica total não excede 100 UFC por g. Atende aos requisitos dos testes de ausência de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, espécies de Salmonella e Escherichia coli.
Endotoxinas bacterianas 85 - Contém não mais que 0,4 Unidade de Endotoxina USP por mg de paclitaxel.
Água, Método Ic<921>: não mais que 4,0%.
Resíduo na ignição<281>: não mais que 0,2%.
Metais pesados, Método II<231>: 0,002%.
Compostos Relacionados -
teste 1 (para material rotulado como isolado de fontes naturais) - Se o material estiver em conformidade com este teste, a rotulagem indica que ele atende ao Teste 1 de compostos relacionados da USP.
Diluente-Prepare conforme indicado no Ensaio.
Solução A-Prepare acetonitrila filtrada e desgaseificada.
Solução B-Prepare água filtrada e desgaseificada.
Fase móvel-Use misturas variáveis ​​de Solução A e Solução B conforme indicado para o sistema cromatográfico. Faça ajustes se necessário (consulte Adequação do Sistema em Cromatografia 621).
Solução de adequação do sistema-Dissolva quantidades pesadas com precisão de Composto A RS relacionado a paclitaxel USP e Composto B RS relacionado a paclitaxel USP em metanol para obter uma solução com concentrações conhecidas de cerca de 10 µg de cada um por mL. Transferir 5,0 mL desta solução para um balão volumétrico de 50 mL, diluir com Diluente até completar o volume e misturar.
Solução padrão-Dissolva, com o auxílio de sonicação, uma quantidade pesada com precisão de Paclitaxel RS USP em Diluente e dilua quantitativamente, e passo a passo se necessário, com Diluente para obter uma solução com uma concentração conhecida de cerca de 5 µg por mL.
Solução de teste-Use a preparação do ensaio.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografia<621>)-O cromatógrafo líquido é equipado com um detector de 227-nm e uma coluna de 4,6-mm × 25-cm que contém empacotamento L43 de 5-µm. A taxa de fluxo é de cerca de 2,6 mL por minuto. A temperatura da coluna é mantida a 30ºC. O cromatógrafo é programado como se segue.
Tempo (minutos) Solução A (%) Solução B (%) Eluição
0–35 35 65 isocrático
35–60 35®80 65®20 gradiente linear
60–70 80®35 20®65 gradiente linear
70–80 35 65 isocrático Cromatografe a solução de adequação do sistema e registre as respostas de pico conforme indicado no Procedimento: os tempos de retenção relativos são cerca de 0,78 para o composto A relacionado ao paclitaxel e 0,86 para o composto B relacionado ao paclitaxel (em relação ao tempo de retenção para o paclitaxel obtido da solução de teste); e a resolução, R, entre o composto A relacionado com paclitaxel e o composto B relacionado com paclitaxel não é inferior a 1,0. Cromatografe a solução padrão e registre as respostas dos picos conforme indicado no Procedimento: o desvio padrão relativo para injeções replicadas não é superior a 2,0%.
Procedimento-Injete um volume (cerca de 15 µL) da solução de teste no cromatógrafo, registre o cromatograma e meça as áreas dos picos principais. Calcule a porcentagem de cada impureza na porção de Paclitaxel tomada pela fórmula:
100(sexta/ru)
em que F é o fator de resposta relativo para cada pico de impureza (ver Tabela 1 para valores); ri é a área de pico para cada impureza individual; e rU é a área do pico do paclitaxel.
Tabela 1
Tempo de retenção relativo Fator de resposta relativo (F) Limite de nome (%)
0,24 1,29 Bacatina III 0,2
0,53 1,00 10-Desacetilpaclitaxel 0,5
0,57 1,00 7-Xilosilpaclitaxel 0,2
0,78 1,26 Cefalomanina (composto A relacionado ao Paclitaxel) a11
0,78 1,26 2'',3''-Diidrocefalomanina a21
0,86 1,00 10-Desacetil-7-epipaclitaxel (composto B relacionado ao paclitaxel) 0,5
1,10 1,00 Análogo de benzila3 b12
1,10 1,00 3'',4''-Desidropaclitaxel C b22
1,40 1,00 7-Epicefalomanina 0,3
1,85 1,00 7-Epipaclitaxel 0,5
1 A resolução pode estar incompleta para estes picos, dependendo das quantidades relativas presentes; a soma de a1 e a2 não é superior a 0,5%.
2 A resolução pode estar incompleta para estes picos, dependendo das quantidades relativas presentes; a soma de b1 e b2 não é superior a 0,5%.
3 O seguinte nome químico é atribuído ao composto relacionado, análogo de benzila:Bacatina III 13-éster com ácido (2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(2-fenilacetilamino)propanoico.
Além de não exceder os limites para impurezas relacionadas com paclitaxel na Tabela 1, não é encontrado mais de 0,1% de qualquer outra impureza única; e não são encontrados mais de 2,0% do total de impurezas.
teste 2 (para material rotulado como produzido por um processo semissintético) — Se o material estiver em conformidade com este teste, a rotulagem indica que ele atende ao Teste 2 de compostos relacionados da USP.
Diluente - Use acetonitrila.
Solução A-Use uma mistura filtrada e desgaseificada de água e acetonitrila (3:2).
Solução B - Use acetonitrila filtrada e desgaseificada.
Fase móvel-Use misturas variáveis ​​de Solução A e Solução B conforme indicado para o sistema cromatográfico. Faça ajustes se necessário (consulte Adequação do Sistema em Cromatografia 621).
Solução de adequação do sistema-Dissolva quantidades pesadas com precisão de Paclitaxel RS da USP e Composto B RS relacionado ao Paclitaxel da USP no Diluente, agitando e sonicando se necessário, para obter uma solução com concentrações conhecidas de cerca de 0,96 mg e 0,008 mg por mL, respectivamente.
Solução teste-Transferir cerca de 10 mg de Paclitaxel, pesado com precisão, para um balão volumétrico de 10 mL, dissolver e diluir com Diluente até volume, agitando e sonicando se necessário, e misturar.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografia 621)— O cromatógrafo líquido é equipado com um detector de 227-nm e uma coluna de 4,6-mm × 15-cm que contém empacotamento L1 de 3-µm. A taxa de fluxo é de cerca de 1,2 mL por minuto. A temperatura da coluna é mantida a 35ºC. O cromatógrafo é programado como se segue.
Tempo (minutos) Solução A (%) Solução B (%) Eluição
0-20 100 0 isocrático
20-60 100®10 0®90 gradiente linear
60-62 10®100 90®0 gradiente linear
62-70 100 0 isocrático Cromatografe a solução de adequação do sistema e registre as respostas de pico conforme indicado no Procedimento: os tempos de retenção relativos são cerca de 0,94 para o composto B relacionado ao paclitaxel e 1,0 para o paclitaxel; a resolução, R, entre o composto B relacionado com paclitaxel e o paclitaxel não é inferior a 1,2; e o desvio padrão relativo para injeções replicadas não é superior a 2,0%.
Procedimento-Injete separadamente volumes iguais (cerca de 15 µL) do diluente e da solução de teste no cromatógrafo, registre os cromatogramas e meça as áreas de todos os picos. Desconsidere quaisquer picos devidos ao Diluente. Calcule a porcentagem de cada impureza na porção de Paclitaxel tomada pela fórmula:
100(Sex/rs)
em que F é o fator de resposta relativo para cada impureza (ver valores na Tabela 2); ri é a área do pico para cada impureza obtida da solução de teste; e rs é a soma das áreas de todos os picos obtidos da solução Teste.
Tabela 2
Tempo de retenção relativo Fator de resposta relativo (F) Limite de nome (%)
0,11 1,24 10-Desacetilbacatina III 0,1
0,20 1,29 Bacatina III 0,2
0,42 1,39 Fotodegradante2 0,1
0,47 1,00 10-Desacetilpaclitaxel 0,5
0,80 1,00 2-Debenzoilpaclitaxel-2-pentenoato 0,7
0,921 1,00 Anel oxetano aberto, acetil e benzoíla migraram 2 x1
0,921 1,00 10-Acetoacetilpaclitaxel x2
0,941 1,00 10-Desacetil-7-epipaclitaxel (composto B relacionado ao paclitaxel) x3
1,37 1,00 7-Epipaclitaxel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidecadeiapaclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-Acetilpaclitaxel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-bacatina III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paclitaxel 0,3
1 A resolução pode estar incompleta para estes picos, dependendo das quantidades relativas presentes; a soma de x1, x2 e x3 não é superior a 0,4%.
2 Os seguintes nomes químicos são atribuídos aos compostos relacionados Fotodegradante; O anel oxetano se abriu, acetil e benzoíla migraram; e 10,13-Bissidechainpaclitaxel:
Fotodegradante
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetiloxi-5,13-di-hidroxi-4,16,17,17-tetra metil-8-oxa-3-oxo-12-fenilcarboniloxipentaciclo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadec-15-il
(2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino)propanoato
Anel de oxetano aberto, acetil e benzoíla migraram
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetiloxi-1,2,4,7-tetrahidroxi-8,12,15,15-tetrametil-9-oxo-4-(fenilcarboniloximetil)triciclo[9.3.1.03,8]pentadec-11-en-13-il
(2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino)propanoato
10,13 - Paclitaxel de cadeia bisside
Bacatina III 13-éster com ácido (2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino)propanóico, 10-éster com (2S,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino)propanóico
Além de não exceder os limites para impurezas relacionadas com paclitaxel na Tabela 2, não é encontrado mais de 0,1% de qualquer outra impureza única; e não são encontrados mais de 2,0% do total de impurezas.
teste 3 (para material rotulado como produzido por um processo de fermentação de células vegetais) - Se o material estiver em conformidade com este teste, a rotulagem indica que ele atende ao Teste 3 de compostos relacionados da USP.
Solução A-Prepare uma mistura filtrada e desgaseificada de água e acetonitrila (3:2).
Solução B-Prepare acetonitrila filtrada e desgaseificada.
Fase móvel-Use misturas variáveis ​​de Solução A e Solução B conforme indicado para o sistema cromatográfico. Faça ajustes se necessário (consulte Adequação do Sistema em Cromatografia 621).
Solução de adequação do sistema-Dissolva a Mistura de Impurezas de Paclitaxel USP RS em acetonitrila, sonicando se necessário, para obter uma solução com uma concentração conhecida de cerca de 1 mg por mL.
Solução padrão-Dissolva uma quantidade pesada com precisão de Paclitaxel RS USP em acetonitrila, sonicando se necessário, para obter uma solução com uma concentração conhecida de cerca de 1 mg por mL.
Solução teste-Transferir cerca de 10 mg de Paclitaxel, pesados ​​exatamente, para um balão volumétrico de 10-mL. Dissolver e diluir com acetonitrila até o volume, sonicando se necessário, e misturar.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografia 621)— O cromatógrafo líquido é equipado com um detector de 227-nm e uma coluna de 4,6-mm × 15-cm que contém empacotamento L1 de 3-µm. A taxa de fluxo é de cerca de 1,2 mL por minuto. O cromatógrafo é programado da seguinte forma.
Tempo (minutos) Solução A (%) Solução B (%) Eluição
0-28 100 0 isocrático
28-33 100®98 0®2 gradiente linear
33–58 98®10 2®90 gradiente linear
58-60 10 90 isocrático
60-63 10®100 90®0 gradiente linear
63-70 100 0 isocrático Cromatografe a solução de adequação do sistema e registre as respostas dos picos conforme indicado no Procedimento: a resolução, R, entre o paclitaxel e o análogo de benzila não é inferior a 1,8. Cromatografe a solução padrão e registre as respostas dos picos conforme indicado no Procedimento: o desvio padrão relativo para injeções replicadas não é superior a 2,0%. [nota – Para fins de identificação do pico, os tempos de retenção relativos aproximados são fornecidos na Tabela 3. Os tempos de retenção relativos são medidos em relação ao Paclitaxel. ]
Tabela 3
Nome Limite de Tempo de Retenção Relativo (%)
Análogo de propil1 0,54 0,2
Cefalomanina (composto A relacionado ao paclitaxel) 0,76 0,5
seg-Análogo butílico2 0,81 0,2
n-Análogo butílico3 0,89 0,1
Análogo de benzila 1,10 0,4
Bacatina VI 1,23 0,2
Análogo Pentil4 1,31 0,2
7-Epipaclitaxel 1,51 0,4
1 O seguinte nome químico é atribuído ao composto relacionado Análogo de propila:Éster 13-de bacatina III com ácido (2R,3S)-3-butanoilamino-2-hidroxi-3-fenilpropanoico.
2 O seguinte nome químico é atribuído ao composto relacionado sec-Análogo de butila:Éster 13-de bacatina III com ácido (2R,3S)-2-hidroxi-3-(2-metilbutanoilamino)-3-fenilpropanoico.
3 O seguinte nome químico é atribuído ao composto relacionado n-Análogo butílico:Éster 13-de bacatina III com ácido (2S,3S)-2-hidroxi-3-(pentanoilamino)-3-fenilpropanoico.
4 O seguinte nome químico é atribuído ao composto relacionado análogo de pentila:éster 13-de bacatina III com ácido (2R,3S)-3-(hexanoilamino)-2-hidroxi-3-fenilpropanoico.
Procedimento-Injete um volume (cerca de 12 µL) da solução de teste no cromatógrafo, registre o cromatograma e meça as áreas de todos os picos. Calcule a porcentagem de cada impureza na porção de Paclitaxel tomada pela fórmula:
100(ri/rU)
em que ri é a resposta de cada impureza individual; e rU é a soma das áreas de todos os picos obtidos da solução Teste. Além de não exceder os limites para impurezas relacionadas com paclitaxel na Tabela 3, não é encontrado mais de 0,1% de qualquer outra impureza única; e não são encontrados mais de 2,0% do total de impurezas.
Ensaio -
Diluente-Prepare uma mistura de metanol e ácido acético (200:1).
Fase móvel-Prepare uma mistura filtrada e desgaseificada de água e acetonitrila (11:9). Faça ajustes se necessário (consulte Adequação do Sistema em Cromatografia 621).
Preparação padrão-Dissolva, usando sonicação, se necessário, uma quantidade pesada com precisão de Paclitaxel RS da USP em Diluente e dilua quantitativamente, e gradualmente, se necessário, com Diluente para obter uma solução com uma concentração conhecida de cerca de 1 mg por mL.
Preparação do ensaio-Transferir cerca de 10 mg de Paclitaxel, pesado com precisão, para um balão volumétrico de 10-mL. Dissolver no Diluente, usando sonicação se necessário, diluir com Diluente até o volume e misturar.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografia<621>)-O cromatógrafo líquido é equipado com um detector de 227-nm e uma coluna de 4,6-mm × 25-cm que contém empacotamento L43 de 5-µm. A taxa de fluxo é de cerca de 1,5 mL por minuto. Cromatografe a preparação do padrão e registre as respostas dos picos conforme indicado no Procedimento: o fator de cauda está entre 0,7 e 1,3; e o desvio padrão relativo para injeções replicadas não é superior a 1,5%.
Procedimento-Injete separadamente volumes iguais (cerca de 10 µL) da preparação padrão e da preparação do ensaio no cromatógrafo, registre os cromatogramas e meça as áreas dos picos principais. Calcule a quantidade, em mg, de C47H51NO14 na porção de Paclitaxel tomada pela fórmula:
10C(rU/rS)
em que C é a concentração, em mg por mL, de Paclitaxel RS da USP na preparação padrão; e rU e rS são as respostas máximas para o paclitaxel obtidas a partir da preparação do Ensaio e da preparação Padrão, respectivamente.