DEFINIÇÃO
Succinato de polietilenoglicol de vitamina E é uma mistura formada pela esterificação de succinato de ácido d-alfa tocoferil e polietilenoglicol. A mistura de ésteres consiste principalmente de polietilenoglicol monoesterificado e uma pequena quantidade de polietilenoglicol diesterificado. Contém NLT 25,0% de d-alfa tocoferol (C29H50O2).
IDENTIFICAÇÃO
• A. Teste de identificação por cromatografia gasosa
Análise: Proceda conforme indicado no teste de Conteúdo de Alfa Tocoferol.
Critérios de aceitação: O tempo de retenção do pico principal da solução amostra corresponde ao da solução padrão.
COMPOSIÇÃO
• Conteúdo de Alfa Tocoferol
Solvente: 0,25 mL de fenolftaleína TS em 1 L de álcool
Solução padrão interno: 12 mg/mL de araquidato de etila em isooctano
Solução padrão: Transferir 32,5 mg de Alfa Tocoferol RS da USP para um frasco de reação adequado. Adicione 2 mL de piridina e 0,5 mL de N,O-bis(trimetilsilil)trifluoroacetamida com 1% de trimetilclorossilano e aqueça o balão a 100ºC por 10 min. Resfrie o frasco, adicione 5,0 mL de solução de padrão interno seguido de 20 mL de isooctano e agite.
Solução amostra: Transfira uma quantidade equivalente a 0,100–0,160 g de Succinato de Polietilenoglicol de Vitamina E fundido a 60ºC para um tubo de cultura (cerca de 20 cm de comprimento e 2,5 cm de diâmetro) equipado com uma tampa de rosca. Adicione 40–50 mg de ácido ascórbico e algumas lascas ferventes, seguido de 20 mL de solvente. [Nota-Reflua a solução suavemente sem emissão de conteúdo.] Coloque o tubo em um bloco de aquecimento ajustado para 100–150. Quando a amostra estiver completamente dissolvida, adicione 0,25 g de hidróxido de potássio e continue em refluxo por 30 min. Retire o tubo do fogo e, enquanto o conteúdo ainda estiver quente, adicione 1–2 mL de ácido clorídrico gota a gota até que a coloração rosa desapareça. [Cuidado-Reação exotérmica. Deixe o ácido escorrer pelo interior do tubo para evitar respingos.] Resfrie o tubo e lave as laterais do tubo com 20 mL de água. Adicione 5,0 mL de solução de padrão interno, tampe e agite para garantir uma mistura completa. Deixe o tubo repousar até que duas camadas distintas sejam formadas. Transfira 2,5-3,5 mL da camada superior para um balão de reação adequado e adicione 2,0 mL de piridina seguido de 2,5 mL de N,O-bis(trimetilsilil)trifluoroacetamida com 1% de trimetilclorosilano. Aquecer o frasco a 100ºC durante 10 min. Deixe esfriar e adicione 12 mL de isooctano.
Sistema cromatográfico
(Ver Cromatografia 621, Adequação do Sistema.)
Modo: GC
Detector: Ionização de chama
Coluna: capilar de sílica fundida de 0,25-mm × 15-m; revestido com um filme de 0,25-µm da fase G27
Temperatura
Injetor: 280
Detector: 345
Coluna: Ver Tabela 1.
Tabela 1
Temperatura inicial(°) Rampa de temperatura (°/min) Temperatura final (°) Tempo de manutenção na temperatura final (min)
260 20 340 1
Gás transportador: Hélio
Taxa de fluxo: 1,5 mL/min
Tamanho da injeção: 1 μL
Tipo de injeção: proporção de divisão, 200:1
Adequação do sistema
Amostra: Solução padrão
Requisitos de adequação
Fator de cauda: NMT 2,0 para o pico de alfa tocoferol
Desvio padrão relativo: NMT 2,0% para a razão entre a área do pico do alfa tocoferol e a área do pico do padrão interno
Análise
Amostras: solução padrão e solução de amostra
Calcule a porcentagem de d-alfa tocoferol (C29H50O2) na porção de Succinato de Polietilenoglicol de Vitamina E tomada:
Resultado = (RU/RS) × (WS/WU) × 100
RU= razão do padrão interno (área do pico do alfa tocoferol/área do pico do padrão interno) da solução amostra
RS= razão do padrão interno (área do pico do alfa tocoferol/área do pico do padrão interno) da solução padrão
WS= peso de USP Alpha Tocopherol RS usado para preparar a solução padrão (mg)
WU = peso de succinato de polietilenoglicol de vitamina E tomado para preparar a solução de amostra (mg)
Critérios de aceitação: NLT 25,0%
TESTES ESPECÍFICOS
• Rotação óptica, rotação específica 781S
[Nota-Este teste identifica d-alfa tocoferol após saponificação.]
Solução amostra: Transfira 0,9 g de Succinato de Polietilenoglicol de Vitamina E, fundido a 60ºC, para um tubo de ensaio adequado com tampa e dissolva em 10,0 mL de álcool. Coloque o tubo em um bloco de aquecimento ajustado em 100–105. [Nota-Reflua suavemente a solução sem emissão de conteúdo. ] Quando a amostra estiver totalmente dissolvida, adicione 2–3 pastilhas de hidróxido de sódio e continue em refluxo por mais 30 min. Retire o tubo do fogo e, enquanto o conteúdo ainda estiver quente, neutralize usando fenolftaleína como indicador adicionando lentamente 10 mL de uma mistura de água e ácido clorídrico (1:1) até que a cor rosa desapareça. [Cuidado-Reação exotérmica. Deixe a solução ácida escorrer pelo interior do tubo para evitar respingos.] Resfrie o tubo, tampe e agite até que o conteúdo esteja bem misturado. Adicione 25,0 mL de heptano, tampe e agite por 1 min para garantir uma mistura completa. Deixe o tubo repousar até que duas camadas distintas sejam formadas. Transfira a camada superior para um tubo de cultura limpo e seco e adicione 10,0 mL de água à solução recuperada. Tampe, agite e deixe as camadas se separarem. Transfira a camada superior para um tubo limpo e seco. Adicione 10,0 mL de solução de ferricianeto de potássio, preparada dissolvendo 2 g de ferricianeto de potássio em 10,0 mL de hidróxido de sódio 0,2 M, e recoloque a tampa. Agite vigorosamente por 45 segundos e deixe as camadas se separarem por 30 minutos. Se a camada superior de heptano estiver clara, prossiga com a medição para rotação específica; se não estiver claro, seque sobre sulfato de sódio anidro antes de prosseguir com o teste. [Nota-Use os resultados do teste de Conteúdo de Alfa Tocoferol para calcular a rotação específica.]
Critérios de aceitação: NLT +24,0
• Solubilidade em Água
Amostra: 20 g de succinato de polietilenoglicol de vitamina E derretido
Análise: Coloque a amostra em um recipiente de vidro sobre um agitador magnético. Adicione imediatamente 80 mL de água fervente enquanto mexe. Deixe esfriar até a temperatura ambiente com agitação constante.
Critérios de aceitação: A solução torna-se límpida em 3 horas.
• Valor ácido
Amostra: 1 g de Succinato de Polietilenoglicol Vitamina E
Análise: Dissolver a amostra em 25 mL de uma mistura de álcool e éter (1:1) que foi neutralizada a fenolftaleína com hidróxido de sódio 0,1 N. Adicione 0,5 mL de fenolftaleína TS e titule com hidróxido de sódio 0,10 N até que a solução permaneça levemente rosada após agitação por 30 s.
Critérios de aceitação: NMT 0,027 mEq/g, equivalente a NMT 0,27 mL de hidróxido de sódio 0,10 N
REQUISITOS ADICIONAIS
• Embalagem e Armazenamento: Conservar em recipientes hermeticamente fechados e armazenar protegido da luz.
• Rotulagem: A rotulagem indica o teor de d-alfa tocoferol, expresso em mg/g.
• Padrões de Referência USP 11
USP Alfa Tocoferol RS