Xilazina
C12H16N2S220.34
4H-1,3-Tiazina-2-amina, N-(2,6-dimetilfenil)-5,6-di-hidro-.
5,6-Dihidro-2-(2,6-xilidino)-4H-1,3-tiazina [7361-61-7].
» A xilazina contém no mínimo 98,0 por cento e no máximo 102,0 por cento de C12H16N2S.
Embalagem e armazenamento - Conservar em recipientes apertados. Loja às 25h, excursões permitidas entre 15 e 30h.
Rotulagem - Quando se destina apenas ao uso veterinário, o rótulo indica isso.
Padrões de referência USP<11>
Xilazina RS da USP
Identificação-
A: Absorção infravermelha<197K>.
B: Absorção ultravioleta<197U>-
Solução: 5 µg por mL.
Meio: ácido clorídrico 0,1 N.
C: Teste de identificação cromatográfica de camada fina<201>-
Solução teste: 2 mg por mL, em clorofórmio.
Sistema solvente em desenvolvimento: acetona, clorofórmio e metanol (2:1:1).
Procedimento- Antes das aplicações da solução Teste e da solução Padrão, seque a placa a 105ºC por pelo menos 30 minutos e deixe-a esfriar em um dessecador. Deixar secar as aplicações com o auxílio de uma corrente de ar quente e desenvolver. Examine sob luz UV de comprimento de onda curto: o tamanho, a intensidade e o valor de RF do ponto principal obtido da solução de teste correspondem aos do ponto principal obtido da solução padrão.
Faixa de fusão<741>: entre 136 e 142.
Perda por secagem<731>- Seque em vácuo a 60ºC durante 4 horas: não perde mais de 0,5% do seu peso.
Resíduo na ignição<281>: não mais que 0,1%.
Metais pesados, Método II<231>: 20 µg por g.
Limite de 3-amino-1-propanol- Prepare uma solução de teste de xilazina em metanol contendo 100 mg por mL, usando sonicação para conseguir a dissolução. Prepare uma solução padrão de 3-amino-1-propanol em metanol contendo 0,5 mg por mL. Aplique separadamente 5 µL da solução de teste e da solução padrão em uma placa cromatográfica de camada fina (ver Cromatografia<621>) revestida com uma camada de 0,25mm de sílica gel cromatográfica. Deixar secar as aplicações e revelar os cromatogramas em câmara cromatográfica saturada, contendo um sistema solvente composto por uma mistura de álcool e hidróxido de amônio (80:20) até que a frente do solvente tenha se movido cerca de três quartos do comprimento da placa. Remova a placa da câmara cromatográfica, marque a frente do solvente e seque a placa ao ar. Pulverize a placa com uma solução alcoólica de ninidrina (1 em 500) e aqueça imediatamente a placa no forno a 105. Quando as manchas ficarem visíveis, retire a placa do forno e deixe esfriar. Examinar os cromatogramas e comparar as intensidades dos spots correspondentes ao 3-amino-1-propanol: a intensidade do spot do 3-amino-1-propanol obtido da solução teste não é maior que a do spot do 3-amino-1-propanol obtido da solução padrão (0,5%).
Limite de acetona e álcool isopropílico -
Diluente - Diluir 15 mL de ácido acético glacial com água até 1000 mL e misturar.
Solução padrão- Transferir 10,0 µL de acetona e álcool isopropílico para um balão volumétrico de 500 mL, diluir com Diluente até o volume e misturar. Esta solução contém 15,8 µg de acetona por mL e 15,7 µg de álcool isopropílico por mL.
Solução de teste - Transferir cerca de 100 mg de Xilazina, pesada com precisão, para um balão volumétrico de 10 mL, dissolver e diluir com Diluente até o volume e misturar.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografia<621>)- O cromatógrafo gasoso é equipado com um detector de ionização de chama e uma coluna de 2-mm × 1,8-m preenchida com 0,1% de fase G25 em 80- para 100 - suporte de malha S7. O hélio é usado como gás de arraste com uma vazão de cerca de 30 mL por minuto. As temperaturas da porta de injeção e do detector são mantidas em cerca de 240 e 275, respectivamente. O sistema é programado de acordo com as etapas a seguir. A temperatura da coluna é mantida a 30ºC durante 6 minutos após cada injeção, depois aumentada para 100ºC a uma taxa de 10ºC por minuto, depois aumentada ainda mais para 220ºC a uma taxa de 15ºC por minuto, e mantida durante 10 minutos. Cromatografe a solução padrão e registe as respostas dos picos conforme indicado no Procedimento: os tempos de retenção relativos são cerca de 0,75 para acetona e 1,0 para álcool isopropílico; a resolução, R, entre acetona e álcool isopropílico não é inferior a 2,0; o fator de cauda determinado a partir de cada pico do analito não é superior a 2,0; e o desvio padrão relativo para injeções replicadas não é superior a 2,0%.
Procedimento- Injete separadamente volumes iguais (cerca de 2 µL) da solução padrão e da solução teste no cromatógrafo, registre os cromatogramas e meça as áreas dos picos principais. Calcule os percentuais de acetona e álcool isopropílico na porção de Xilazina tomada pela fórmula:
(C/W)(rU / rS)
em que C é a concentração, em µg por mL, de acetona ou álcool isopropílico em cada mL da Solução Padrão; W é o peso, em mg, de Xilazina utilizado para preparar a Solução Teste; e rU e rS são as respostas para o pico do analito relevante obtido da solução teste e da solução padrão, respectivamente: não são encontrados mais de 0,02% de acetona e não mais de 0,2% de álcool isopropílico.
Pureza cromatográfica -
Solução A, Solução B, Fase Móvel e Diluente- Proceda conforme indicado no Ensaio.
Solução padrão- Diluir quantitativamente um volume medido com precisão da preparação padrão preparada no Ensaio com Diluente para obter uma solução com uma concentração de 0,008 mg de Xilazina RS da USP por mL.
Solução de teste - Transfira cerca de 100 mg de Xilazina, pesada com precisão, para um balão volumétrico de 10 mL, adicione 5,0 mL de Solução B e agite para dissolver. Adicione cerca de 4 mL de Solução A e agite. Diluir com a Solução A até o volume e misturar.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografia<621>)- O cromatógrafo líquido está equipado com um detector de 205 nm e uma coluna de 4,6 mm × 25 cm que contém o empacotamento L7 e uma coluna de guarda. A taxa de fluxo é de cerca de 1 mL por minuto. Equilibrar a coluna com uma fase móvel consistindo em 75% de Solução A e 25% de Solução B. Manter esta composição por 8 minutos após cada injeção, após o que a proporção de Solução B é aumentada linearmente de 25% para 70% durante um período de 27 minutos, e mantida nessa composição por 5 minutos; em seguida, aumente rapidamente a proporção da Solução A para 75% antes da próxima injeção. Cromatografe a solução padrão e registe as respostas dos picos conforme indicado no Procedimento: o factor de cauda não é superior a 1,5; e o desvio padrão relativo para injeções replicadas não é superior a 5,0%.
Procedimento- Injete separadamente volumes iguais (cerca de 10 µL) da solução padrão e da solução teste no cromatógrafo, registre os cromatogramas e meça as áreas dos picos principais. Calcule a porcentagem de cada impureza na Xilazina obtida pela fórmula:
1000(C/W)(ri F/rS)
em que C é a concentração, em mg por mL, de Xilazina RS USP na Solução Padrão; W é o peso, em mg, de Xilazina utilizado para preparar a Solução Teste; ri é a resposta de qualquer pico de impureza individual no cromatograma da solução teste que não esteja presente no cromatograma do diluente; F é o fator de resposta de 0,72 para o pico de 2,6-dimetilanilina em um tempo de resposta de cerca de 0,8 em relação ao tempo de retenção da xilazina, de 0,36 para uma impureza em um tempo de retenção relativo de cerca de 1,3, 0,37 para isotiocianato de 2,6-dimetilfenil em um tempo de retenção relativo de cerca de 2 e 1,0 para qualquer outra impureza; e rS é a resposta do pico da xilazina no cromatograma da solução padrão: não é encontrado mais de 0,5% de qualquer impureza individual; e a soma de todas as impurezas encontradas não ultrapassa 1%.
Ensaio -
Solução A- Dissolva 3,03 g de 1-heptanossulfonato de sódio em 800 mL de água, ajuste com ácido sulfúrico 2 N para um pH de 3,0, dilua com água até 1000 mL e misture. Passe por um filtro com porosidade de 0,5 µm ou mais fina.
Solução B- Use acetonitrila.
Fase móvel - Use misturas variáveis de Solução A e Solução B conforme indicado para o sistema cromatográfico.
Diluente - Prepare uma mistura de Solução A e Solução B (50:50).
Preparação padrão- Prepare uma solução de USP Xilazina RS em Diluente com uma concentração conhecida de cerca de 0,4 mg por mL.
Preparação do ensaio - Transferir cerca de 10 mg de Xilazina, pesados ​​exatamente, para um balão volumétrico de 25 mL, diluir com Diluente até o volume e misturar.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografia<621>)- O cromatógrafo líquido está equipado com um detector de 226 nm e uma coluna de 3,9 mm × 30 cm que contém o empacotamento L1. A taxa de fluxo é de cerca de 1 mL por minuto. Equilibrar a coluna com uma fase móvel consistindo em 70% de Solução A e 30% de Solução B. Manter esta composição por 5 minutos após cada injeção, após o que a proporção de Solução B é aumentada linearmente de 30% a 40% durante um período de 5 minutos, e mantida nessa composição por 5 minutos; em seguida, aumente rapidamente a proporção da Solução A para 70% antes da próxima injeção. Cromatografe a preparação do padrão e registre as respostas dos picos conforme indicado no Procedimento: o fator de cauda não é superior a 2,0; e o desvio padrão relativo para injeções replicadas não é superior a 2,0%.
Procedimento- Injete separadamente volumes iguais (cerca de 10 µL) da preparação padrão e da preparação do ensaio no cromatógrafo, registre os cromatogramas e meça as áreas dos picos principais. Calcule a quantidade, em mg, de C12H16N2S na porção de Xilazina tomada pela fórmula:
25C(rU / rS)
em que C é a concentração, em mg por mL, de Xilazina RS USP na preparação Padrão; e rU e rS são as respostas do pico de xilazina obtidas a partir da preparação do Ensaio e da preparação Padrão, respectivamente.